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实验一油镜和测微尺的使用及细胞大小测量 浙江大学生命科学学院

目的要求 • 掌握油镜和测微尺的使用方法 • 学会用测微尺测量细胞, 增强对细胞和 细胞器的真实大小的感性认识 • 按适当比例画出细胞大小示意图

用品材料 • 玻片标本 • 台微尺;目微尺 • 显微镜、擦镜纸、载玻片、香柏油、二甲苯

油镜的使用 • 油镜比干燥系高倍物镜的工作距离短得多，最短的只有0.1 mm，且调焦程序又不同于干燥系物镜，操作时须特别细心，防止油镜压碎标本或损坏油镜。

聚光器高度的调节 • 用油镜前，先将集光器上升到顶，虹彩放大，使亮度达到最强度。一般的聚光镜，在平行光照射的情况下，其焦点落在它上端透镜平面中心上方约1.25mm处。当使用高倍或油镜时，由于放大率大，镜像亮度小，需要较强的照明。因此，应把聚光器升至最高，以便使聚光镜的焦点正好落在标本平面上。但在使用低倍镜时，可将聚光器适当下降。

物镜的正确调焦 • 先在干燥系高倍物镜下找准被检物，并置于视野中央，然后升高镜筒约1.5 cm，再把油镜头旋转至对准正下方。 • 在玻片标本的镜检部位滴一滴浸液（镜头油），将头偏于一侧观察，下降镜筒，到物镜的前透镜与浸液接触时停止。 • 继而从目镜里细心观察视野，旋转粗准焦螺旋，使镜筒缓慢地上升，刚出现不太清晰的物象时就换用细准焦螺旋，至物象清晰后进行观察。

油镜与玻片的清洗 • 油镜使用完毕，提升镜筒约2 cm，把油镜转离光轴，先用擦镜纸擦去镜头上的大部分油，再用浸少量二甲苯的擦镜纸擦去镜头上的残余油迹，最后用干擦镜纸擦去镜头上的二甲苯。擦拭时要顺镜头的直径方向，不要沿镜头的圆周方向擦。玻片标本上的油也要进行清洁，即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上，在纸上滴一些二甲苯，趁湿把纸往外拉，这样连续作三四次即可干净

0.01mm 0 1 5 2 6 3 7 4 8 测微尺的使用 (一)测微尺的规格 测微尺分目镜测微尺和镜台测微尺，两尺配合使用。 目镜测微尺是一块圆形玻片，其中央刻有精确等分的刻度，有把5毫米刻成为50等分或把10毫米长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象。 镜台测微尺是在一个载片中央封固的尺，长1毫米(1000μm)，被分为100格，每格长度是10微米。标尺的外围有一黑色的小环，以便在显微镜下寻找标尺位置，标尺的圆环上复有一圆形盖玻片以作保护。盖玻片是用树胶粘在在玻片上的，因此避免二甲苯与其接触。

(二)原理 由于不同的显微镜放大倍数不同，同一显微镜在不同的目镜、物镜组合下，其放大倍数也不相同，而目镜测微尺是处在目镜的隔板上，每格实际表示的长度不随显微镜的总放大倍数的放大而放大，仅与目镜的放大倍数有关，只要目镜不变，它就是定值。而显微镜下的细胞物象是经过了物镜、目镜两次放大成象后才进入视野的。即目镜测微尺上刻度的放大比例与显微镜下细胞的放大比例不同，只是代表相对长度，所以使用前须用置于镜台上的镜台测微尺(或血球计数板)校正，以求得在一定放大倍数下实际测量时的每格长度。

(三)测微尺标定方法 1更换目镜镜头 取下目镜上部或下部的透镜，在光圈的位置上安上目镜测微尺，刻度朝下，再装上透镜，制成一个目镜测微尺的镜头。 2某一倍率下标定目镜刻度 将镜台测微尺置于载物台上，使刻度面朝上，先用低倍镜对准焦距、看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器使两尺重叠，并使二尺的左边的某一刻度相重合，向右寻找另外二尺相重合的刻度。记录两重叠刻度间的目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数

3计算该倍率下目镜刻度目镜测微尺每格长度=镜台测微尺格数/目镜测微尺格数xl0um 3计算该倍率下目镜刻度 目镜测微尺每格长度=镜台测微尺格数/目镜测微尺格数xl0um 4标定并计算其他放大倍率下的目镜刻度 以同样方法分别在不同倍率的物镜下测定目镜测微尺每格代表的实际长度。如此测定后的测微尺的长度，仅适用于测定时使用的显微镜以及该目镜与物镜的放大倍率。

此标定方法注意事项： • 在高倍物镜下台微尺的刻度线显得很粗，而且目微尺的刻度与它相比是很细的，故校正时目微尺左端的刻线应放在台微尺左端刻线的左旁边缘。 • 标定值只能在同一放大倍数下进行测量。

*装入目镜测微尺 放镜台测微尺于载物台 调节使镜台测微尺与目镜测微尺平行 记录二者在重合线之间的刻度 取下镜台测微尺 计算标定值 目镜测微尺的标定

转动目镜镜筒 短轴 目镜测微尺 长轴 如何进行细胞的显微测量？

(四)测量和求平均值 测量 将标本先某一倍率下找到目的物，然后用目镜测微尺测定每个细胞长度和宽度所占的刻度，即可换算成细胞的长和宽。 求平均值 一般测量细胞的大小，用同一放大倍数在同一标本上任意测定l0一20个细胞后，求出其平均值即可代表该细胞的大小。

分别记录5个细胞的长径和短径，并计算平均值。分别记录5个细胞的长径和短径，并计算平均值。 细胞测量结果 单位：m 目镜测微尺标定 （1）标定物镜：40 （2）重合线之间， 目镜测微尺格，镜台测微尺格 （3）求值： 目镜测微尺的每一小格相当于镜台测微尺的小格 目镜测微尺的标定值为微米

作业　 • 按比例绘出所观察的结果

The End