样品检测结果B、C类解决方案

2三代DNA样本纯度检测

如果样本OD260/280＜1.8，可能原因是样品中存在蛋白质或酚污染；样本OD260/230＜1.6，可能原因是样本中存在盐和小分子杂质，如核苷酸、氨基酸等。存在污染，可能会影响DNA分子打断效率、干扰DNA分子定量的准确性，影响文库随机性，抑制酶的活性，导致建库失败。

3三代DNA样本完整性检测示例

Agilent 4200 Bioanalyzer检测峰图

琼脂糖凝胶电泳检测结果展示

三代DNA完整性要求Agilent 4200 Bioanalyzer检测峰图主带＞30kb，主峰前基线平整，无杂峰。样品片段过短，严重影响三代测序读长。样品降解、蛋白污染或RNA污染，会严重影响建库质量。

4三代DNA样本类型

通过检测对样品质量进行分类，A、B类样本可正常建库上机测序，C类样本建库有风险，而D类样本，建议老师重新送样，提取。

5动植物基因组三代DNA送样要求

样品DNA满足

浓度≥80ng/μl，DNA总量≥8μg，主带≥30kb；

无RNA污染，DNA样本无颜色，不粘绸，无杂带；

OD260/280在1.8-2.0，OD260/230在1.6-2.5，QC/NC在0.5-2.0。

6送样建议

01

动物样本

a） 体外培养细胞，快速移去培养液，用PBS清洗1~2次，低速离心除去PBS。不同类型的细胞DNA得率有差异，体积越大得率越低，可适当增加细胞量。

b） 动物血液，使用EDTA抗凝采血管收集，不可使用肝素抗凝，鸟类和鱼类血液红细胞含有细胞核，DNA得率高，而人和哺乳动物无细胞核，得率偏低。

c） 动物组织，优先选择代谢活跃的肝脏组织，肌肉组织不推荐，鱼类和禽类，推荐选取血液或肝脏组织。

02

植物样本

优先选择生长旺盛的组织部位，避免选取多糖多酚组织，如老叶片和果实，尤其是果实和药用植物，避免使用蜡质层厚的组织。用70%乙醇或无菌水将表面灰尘冲洗干净。

03

菌类

选取对数生长期的菌体进行收集，去除培养基等杂质。

所有样本，收集后需尽快置于液氮或-80℃冰箱中速冻，干冰运输。

文案：动植物DNA产品线产品经理 高国日

设计：胡珊珊返回搜狐，查看更多