计算和评估ELISA数据

吸光度值落在标准曲线范围外的样品

要获得准确的结果，应先稀释这些样品，再继续进行ELISA染色。若使用这类样品，在分析结果时须将由标准曲线获得的浓度乘以稀释倍数。​

变异系数(CV)为标准差σ与平均数µ的比值：

Cv=  σ        µ

这一数据即为方差占平均数的百分比，代表了结果的不一致性和不准确性。方差越大表示结果的一致性和准确性越差。有些计算机程序能够计算ELISA结果的CV值。

CV较大可由以下原因引起：

加标回收率可判断的样品成分对抗体抗原检测的影响。例如，组织培养物上清液中所含的大量蛋白质可能会阻碍抗体结合，提高信噪比，从而导致得到的浓度低于实际值。

将已知浓度的蛋白质加至样品基质和标准稀释剂中。用同样的测定方法对加标蛋白质进行定量，并将样品基质和标准稀释剂的结果进行对比。

如果二者结果相同，那么样品基质可视为适用于测定程序。如果回收率不同，则说明样品基质中的组分会干扰分析物检测。​​

如果加标回收实验说明样品基质对结果有影响该怎么办？

我们推荐在样品基质中稀释标准品以得到标准曲线。样品基质对结果的一切影响也存在于标准品中，因此标准曲线和样品间的比较更为准确。我们许多的ELISA试剂盒中包含专为此提供的标准血清稀释剂。

另一解决方法则是改变样品基质。例如，如果使用未稀释的生物样品，可在标准稀释剂中稀释样品。然而使用此方案，您需要确保在分析结果时将稀释倍数考虑在内，并且浓度保持在标准曲线的线性区域内。

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