超高效液相色谱串联质谱法中药多种成分在大鼠血浆的药代动力学的研究

阅读量：

232

作者：

李青倩

展开

摘要：

中药的成分复杂,治疗的效果是多种成分相互作用的结果,因此,研究中药的活性成分在生物体内的动态变化过程及规律,阐明药物吸收,分布的药代动力学特征十分重要.超高效液相色谱串联质谱技术具有选择性强,灵敏度高等特点,在中药的药代动力学研究应用越来越广泛,是研究药物代谢的有效手段.本论文应用超高效液相色谱串联质谱技术,分别测定大鼠血浆中蒽贝素及中药材三白草,紫花地丁多种活性成分的含量,并建立相应的血浆浓度-时间曲线,计算药代动力学参数,探讨药代动力学特征,为促进中药开发,阐明中药作用机制和设计合理给药方案提供科学依据. 1.应用超高效液相色谱串联质谱法同时测定三白草中原儿茶酸,芦丁,金丝桃苷,异槲皮苷,槲皮苷,木犀草素和三白草酮7种生物活性成分的含量,并应用于在大鼠体内的药代动力学研究.血浆样品通过蛋白沉淀方式处理,以葛根素和大豆苷元为内标,使用含有0.10%乙酸水和乙腈进行梯度洗脱,采用多反应监测模式进行检测.原儿茶酸,芦丁,金丝桃苷,异槲皮苷,槲皮苷,木犀草素和三白草酮在大鼠血浆中的线性范围分别为15.0-600ng·mL-1,25.0-400ng·mL-1,15.0-600ng·mL-1,15.0-300ng·mL-1,12.5-250ng·mL-1,0.25-20ng·mL-1,15.0-400ng·mL-1.日内和日间精度RSD均小于10.8%,准确度RE范围为-9.8%-10.7%.在不同浓度下,7种成分的提取回收率在86.3%-104.8%.该方法准确,快速,-成功应用于7种成分的药代动力学研究. 2.本文建立了一种以大黄素为内标,测定大鼠血浆中蒽贝素的分析方法.血浆样品采用200μL丙酮和200μL乙酸乙酯沉淀蛋白.以0.10%氨水溶液-甲醇作为流动相,0.3mL·min-1的流速进行梯度洗脱.蒽贝素在10-1200ng·mL-1范围内有良好的线性关系,相关系数为0.9990,日内和日间精度RSD均小于8.7%,准确度RE范围为-8.8%-14.0%,提取回收率大于89.2%.该方法简单,快速,准确,选择性强,已成功应用于蒽贝素的药代动力学研究. 3.本文基于超高效液相色谱串联质谱法技术,建立了以大豆苷元为内标,同时测定了大鼠血浆中秦皮乙素,咖啡酸,异莨菪亭,东莨菪内酯,荭草素,异荭草素,芦丁,木犀草素,芹菜素和β-谷甾醇的分析方法.血浆样品采用蛋白沉淀法处理,实验以0.1%甲酸水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,在25min内对10种成分实现分离.秦皮乙素,咖啡酸,异莨菪亭,东莨菪内酯,荭草素,异荭草素,芦丁,木犀草素,芹菜素和β-谷甾醇的线性范围分别为25-7000ng·mL-1,25-800ng·mL-1,0.5-3000ng·mL-1,0.5--4000ng·mL-1,20-500ng·mL-1,25-4000ng·mL-1,50-3000ng·mL-1,25-1000ng·mL-1,0.025-3ng·mL-1和50-3000ng·mL-1,相关系数大于0.9977.提取回收率为80.5%-117.8%.日内和日间精密度RSD均小于14.5%,准确度RE为-13.8%-14.6%.该方法简单快速,已成功应用于大鼠体内10种成分的药代动力学研究.

展开

关键词：

中药成分 液相色谱 液相质谱 药代动力学

学位级别：

硕士

学位年度：

2018

DOI：

10.7666/d.Y3436180