爆哭！几天都没搞定的蛋白纯化，优化这步几小时解决

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师弟

师兄，你居然在实验室通宵？

有个着急要的蛋白，老师喊我加班纯化，结果到手的蛋白跑 SDS-PAGE，目的蛋白量很少，跟杂蛋白也没分开，还得继续想办法。

师兄

师弟

怎么会这样啊……

估计缓冲液的 pH 和电导不合适，得换个缓冲液再试试。

师兄

蛋白纯化作为分子生物学研究领域的重要技术，但传统的人工蛋白质纯化方法有以下缺点：

● 十分耗时，需要进行多个步骤并且使用大量试剂，复杂的纯化过程还会损失大量的样品；

● 对于目的蛋白和杂蛋白的分离需要进行繁琐的多步纯化尝试；

● 手动的操作不但会导致纯化的重复性差，人工操作也非常容易出现操作错误的情况。

为了解决这些难题，基于紫外线的过程分析技术（Process Analysis Technique，PAT）应运而生，该技术通过监测蛋白质分子流过纯化柱时对紫外线的吸光度，可以检测目标蛋白质何时存在、何时不存在，从而实现实时监测和控制纯化过程，确保更高的纯蛋白质产量。基于 PAT 技术，梅特勒托利多推出 UV7 超越系列分光光度计：

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蛋白纯化工艺关键过程参数（缓冲液的电导率、pH 值等）对目的蛋白和杂质的层析分离过程有着显著的影响。开篇出现的问题，就可以利用基于紫外的 PAT 技术监测不同缓冲液性质对层析分离效果的影响，达到有效分离的目的，提升实验重复性。

图 1 PAT 监测过滤膜包载量

那么 PAT 技术还可以为蛋白质的纯化方式带来哪些改变呢？

解放双手：它可以实现连续的蛋白质纯化，这将显著减少与传统分批纯化方法相关的成本；

节约时间：研究表明，使用基于紫外线的 PAT 可以将特定蛋白质的纯化时间从几天缩短到几个小时；

无需标签：作为一种基于紫外吸收检测的非侵入性技术，它不需要使用可能对蛋白质有害的染料或标签。

图 2 PAT 可实现连续蛋白纯化

梅特勒托利多的 UV7 超越系列紫外分光光度计助您科研一臂之力！让你告别传统分批纯化方法，体验全新的蛋白纯化方式，轻松实现在线监测蛋白质纯化工作，它具有以下优势：

基于紫外线的 PAT 更为高效、准确，且可以实现连续的蛋白质纯化，显著减少时间和成本。

具有阵列式检测器，可读取瞬时数值，以高频多点方式动态反应曲线形态。

支持多联池，多通道模式测样，大大缩短测试时间。

专业的 LabX 软件和售后服务支持，贴合在线过程分析场景。

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内容策划：王丹琦内容审核：朱晓芳

题图来源：图虫创意

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