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蛋白质染色技术支持

2024-06-29 22:39| 来源: 网络整理| 查看: 265

不能。上样溶液含有很多SDS,因此,SYPRO™ Ruby、SYPRO™ Orange和SYPRO™ Red染料会只与游离的SDS结合,而极少与蛋白质结合。在电泳前,可预先使用ATTO-TAG™ CBQCA(货号A2333)、DDAO琥珀酰亚胺酯(货号C34553)或TAMRA-琥珀酰亚胺酯(货号C2211)染料或TC-FLAsH™表达分析检测试剂盒(货号A10067为橙黄色荧光,货号A10068为红色荧光)对蛋白质进行共价标记,不会影响蛋白质在凝胶中的迁移。

电泳期间,可将SYPRO™ Orange或SYPRO™ Red蛋白质凝胶染料稀释5000倍并加入到阴极(上层)缓冲液槽中,对蛋白质进行染色而不影响迁移。这样做可能引起的问题是,染料与SDS的相互作用可能导致凝胶产生背景荧光。在电泳后使用7.5%乙酸脱色15–60分钟,可降低这种背景荧光。这种染色方法还会导致蛋白质灵敏度低于标准的后染色方法、在凝胶成像前需要相同的时间以及污染电泳装置。



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