Amplite 荧光法荧光胺蛋白质定量试剂盒 蓝色荧光

样品实验方案

简要概述

1.准备荧光胺工作溶液（25μL）2.添加BSA标准品或测试样品（75μL）3.在室温下孵育5-30分钟4.在Ex / Em = 380 / 470nm处读取荧光强度

溶液制备 

1.1标准溶液

BSA标准通过进行1：2连续稀释，将适量的BSA标准品1 mg / mL（组分C）稀释到PBS中，以获得BSA标准品（BS7-BS1）的连续稀释液。

2.工作溶液

将DMSO（组分B）的全部内容物加入荧光胺（组分A）的瓶中，并充分混合。 注意：2.5 mL的荧光胺工作溶液足以用于1个平板。

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中BSA标准品和测试样品的布局。 BS = BSA标准品（BS1-BS7,1.563至100μg/ mL），BL =空白对照，TS =测试样品。

表2.每个孔的试剂组成

1.根据表1和2中提供的布局制备BSA标准品（BS），空白对照品（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用30μL试剂代替75μL。

2.向BSA标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入25μL荧光胺工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入10μL荧光胺工作溶液，总体积为40μL/孔。

3.在室温下孵育反应5至30分钟，避光。

4.用Ex / Em = 380 / 470nm的荧光板读数器监测荧光增加。

参考文献

Covalent vaccination with Trypanosoma cruzi Tc24 induces catalytic antibody productionAuthors: Sarah M Gunter, Leroy Versteeg, Kathryn M Jones, Keegan P Brian, Ulrich Strych, Maria Elena Bottazzi, Peter J Hotez, Eric L BrownJournal: Parasite immunology (2018): e12585