体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告

体外检测肿瘤细胞增殖实验综述报告

细胞增殖实验是研究肿瘤细胞增殖和药物筛选的重要手段。目前常见的肿瘤细胞增殖

实验包括

MTT

法、

SRB

法、

CCK-8

法和细胞计数法。本综述将介绍常用的

MTT

法和

SRB

法。

一、

MTT

法

    MTT

法是一种常用的检测细胞增殖和细胞存活率的方法。其原理是

MTT

剂通过被细胞

还原，形成紫色沉淀，而细胞活性越强，则代谢产物越多，

MTT

的还原能力也越强，所以

其颜色越深。

MTT

法的步骤如下：

    1. 

细胞接种：将待检测的细胞分离并接种到

96

孔板中，对照组和实验组各重复

3

次，

每孔加入

100 μl

的细胞悬液。

    2. 

细胞培养：将孔板置于

37℃、

5% 

CO2

培养箱中，培养

24h

，待细胞贴附后进入下一

步。

    3. 

加入

MTT

：将

MTT

溶液加入孔板中，加入的量为

100 μl/孔，最终浓度为

0.5 

mg/ml

。

    4. 

离心：孔板离心

5min

，去除上清，加入

150 μl

的

DMSO

，进行溶解。

 5. 

检测：

将各孔

450 nm

波长下吸光度值读取，数据处理和结果分析。

    MTT

法适用于多种肿瘤细胞，操作简便，可用于初筛药物的活性。然而，

MTT

法也存在

局限性，如

MTT

还原能力受到某些实验条件影响，如细胞密度、孵育时间、细胞凋亡等，

需要注意标准化操作。

二、

SRB

法

    SRB

法是酸性快速比色法的缩写，它通过酸性溶液中蛋白质的沉淀和染色，反映了细

胞的增殖情况。该方法操作简单，速度快，结果信度较高。步骤如下：

    3. 

加入

SRB

：将

SRB

溶液加入各孔中，保持

10 min

。

    4. 

洗涤：将各孔反复洗涤至清晰。

    6. 

检测：将各孔

570 nm

波长下吸光度值读取，数据处理和结果分析。

    SRB

法比较适用于肿瘤细胞形态大而扁平的情况。此外，

SRB

法还能够评价细胞的耐药

性，并可用于筛选化合物对细胞增殖的抑制率，是一种较为全面的细胞增殖试验方法。

三、结论