龙琪琛 胡敏 等：液相色谱

FOCUS ON IVDCHINA《临床实验室》  

2023

本文刊载于《临床实验室》杂志2023年5月刊“质谱检测技术临床应用”专题-「实验室诊断技术导航」版块

作者：龙琪琛  罗凤鸣  李冰慧  李子阳  陈芷阳  郭哲  胡敏

单位：长沙市，中南大学湘雅二医院检验医学科

【摘要】

目的

本文旨在开发和验证用于临床血清S1P测量的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法，并比较健康志愿者和两种不同血清型CHB患者的血清S1P水平。

方法

血清样本使用甲醇蛋白沉淀来进行样本前处理。色谱柱使用Kinetex® C18色谱柱（100 x 2.1 mm，2.6μm），通过LC-MS/MS进行S1P的测定。本研究对方法的基质效应、线性、不精密度、分析回收、检测限定量限和携带污染进行了评价，并且对血液样本中S1P的储存稳定性进行了评估。此外，该方法还应用于21名健康志愿者、28名HBeAg阳性CHB患者和42名HBeAg阴性CHB患者的血清S1P检测。

结果

色谱分析时间为4分钟。本方法S1P的检测范围为9.86~804.43 ng/ml（R²>0.9990），定量下限为4.62ng/mL，检测限为1.39ng/ml。总不精密度为2.9%∼7.5%，分析回收率为99.3%~106.3%。室温对全血样本对S1P浓度影响较大，在4℃至少可稳定保存4 h。对于患者样本检测，健康志愿者和HBeAg阴性CHB患者之间的血清S1P水平存在显着差异[297.07(245.18, 314.25) vs.314.90(279.03, 376.38)ng/ml; p