带你真正了解ATP荧光检测仪

二、清洗与消毒，清洗效果与消毒效果

清洁度是控制微生物的基础。

首先，需要正确认识清洗与消毒

1）在任何时候都要将清洗和消毒分开，不能混为一谈，包括效果的验证。

2）在清洗还没有做好的情况下，讨论消毒没有意义。

其次，需要正确认识清洗效果和消毒效果

1）污垢→清洗→清洁度（清洗效果）→推荐ATP方法/蛋白涂抹方法

2）微生物→消毒→杀菌率（消毒效果）→微生物检测

残留的污垢是微生物生长的营养源，如果清洁度不佳的情况下，极少量的微生物即可以很快繁殖到很高的数值。

微生物数量是初始的数量，如果非常干净，没有营养源，即使不消毒，微生物也只能保持较低的水平。

需要说明一点，实际上微生物大部分都是在清洗步骤被去除的。

所以，是否卫生，实际上还是指清洗效果（清洁度），残留污垢的多少。需要去验证清洁度，减少污垢（营养源）的残留，同时可以确保下一步消毒剂效果的有效性。

题外话：

疫情期间，我们要重视洗手、洗手、洗手，而手部消毒的作用是将微生物进一步降低到可以接受的数量，这样就可以保持一段时间都处于微生物安全水平，直到下次洗手。如果洗手不好，不仅初始微生物数量高，微生物生长的营养源也充足，手部就会一直处于不洁净的状态，成为影响健康的污染源。

ATP方法可以用于手部卫生监控，我们可以后续再介绍。

三.清洁度验证方法

检测方法都是针对目标物质设计的。

1）污垢→清洗→清洁度（清洗效果）

2）微生物→消毒→杀菌率（消毒效果）

清洁度对应的目标物质是污垢。污垢，一般都来源于动物、植物、人等，都含有能量物质ATP。所以可以使用ATP方法来进行验证。

ATP方法相比其他验证清洁度的方法，优点如下：

1）快速简便，kikkoman ATP检测时间只需10s。加上取样、反应的全部时间，60s内出结果了。操作非常简单，可以立即给予结果反馈。

2）灵敏度高，可以检测肉眼无法观察的残留污垢。

3）代表性强，检测的是污垢，更代表卫生情况。

4）检测有数值，可以直观判定卫生风险的水平。

除了ATP以外，污垢还可能包括：蛋白、脂肪、糖类、微生物等。目前来看ATP和蛋白质普遍存在，相应的方法适用性更好。

因此，根据污垢成分的特性，清洁度验证方法通常包括：

1）感官检查（目视、触摸、嗅味等）

2）内窥镜检查

3）色素染色

4）黑光灯

5）ATP检测

6）蛋白残留检测

7）生物膜检测

8）微生物检测

9）TOC总有机碳

......

注意：微生物检测用于验证清洗效果，反而往往不能反应真实情况，特别是CIP清洗（高温、高浓度碱酸）。无菌，并不代表洁净。

参考日本医疗器械协会制定的《清洗评估判定指南》（2012年8月修订），列举了目视、色素染色、涂抹法（包括针对蛋白质、三磷酸腺苷的方法）、提取法（蛋白质）。但并没有培养法。

前言：用于快速卫生监控的ATP是便携式ATP荧光检测仪。

1）验证的是清洁度，检测的不是微生物，而是污垢。

2）“无菌”，未必清洁。

四、何谓ATP、ADP、AMP

ATP（三磷酸腺苷）是生物体内（植物、动物、微生物、人）组织细胞一切生命活动所需能量的直接来源。

ADP（二磷酸腺苷）和AMP（一磷酸腺苷）是ATP经过加热、发酵或酶反应等变化而来。

目前，其他厂家都只是检测ATP，只有Kikkoman同时检测ATP、ADP、AMP。

五、RLU与CFU的关系

在实验室单一菌的条件下，RLU和CFU有很好的线性关系。见图1

在实际应用中，污垢的ATP含量远远大于微生物含有的ATP（微生物细胞太小，单个细菌ATP含量极低），同时也无法区分两者。

从图1我们也可以看出，如果有检出数值，需要E.coli达到10的3次方以上，而且RLU数值还是个位数，而常规的推荐合格的范围是200-400RLU，何况洁净表面的微生物远远达不到10的3次方。

另外举一个例子：经过灭菌的牛奶，没有微生物，但是ATP值是很高的。无菌，并不代表洁净。

因此不能直接将ATP荧光检测仪测定的RLU数值和标准平板计数相对比。

ATP水平代表污垢存在的多少，和微生物数量有着密切的相关性，因为污垢是微生物生长的营养源。

六、ATP原理是否可以用于检测微生物

ATP原理是可以用于检测微生物的，有专门的设备、耗材及应用。用于微生物检测，需要进行前增菌以及去除背景值等操作。

和我们现在用于快速卫生监控的便携式ATP检测仪的应用是不一样的。清洁度验证需要的是立即得到结果的方法，检测目标不是微生物，而是污垢。

七、ATP荧光检测仪工作原理

ATP荧光检测仪采用萤火虫发光原理检测ATP。将采样后的ATP测试棉棒插入到提取剂中，细胞内的ATP被释放出来，然后ATP（包括释放出来的ATP以及表面游离的ATP）和独特试剂发生反应，试剂含有荧光素和荧光素酶，在ATP存在的条件下会发光，发出的光可由ATP荧光检测仪进行检测，检测的发光量（RLU）和ATP的总量成正比，RLU数值越高，表明ATP的量越多，也意味着表面的残留物越多。

kikkoman独创A3技术——ATP循环转换法，添加了两种特殊的酶（PK和PPDK），不仅能够检测ATP，ADP和AMP也同时被检测出来，可以避免ATP分解成ADP和AMP的污垢产生的检测盲区，是更加灵敏的检测技术。

八、ATP数值代表什么？

ATP数值的高低，代表了残留污垢的多少，可以判定物体表面的清洁程度。

残留污垢是微生物生长的营养源，代表了之后微生物生长的趋势。

九、ATP荧光检测与微生物平板法的比较

a.RLU与CFU有很高的相关性80-90%，但不会达到100%。

b.微生物平板法是检测的当时的微生物数量

c.ATP检测的是污垢，微生物的营养源，可以发现潜在的可能被污染的地方，更代表了微生物的趋势

ATP检测，不仅与微生物数量CFU高度相关，而且直接检测微生物生长的营养源。所以通过使用ATP快速荧光检测，可以判定各个环节的卫生情况，从而达到卫生控制的目的。可以助力所有需要卫生管理的现场。

十、应用行业

医院、食堂、食品工厂、餐饮、养殖、保洁、公共卫生等所有需要卫生管理的场景。返回搜狐，查看更多