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【Extracellular Vesicle】机械挤压法制备的纳米囊泡对比自然分泌的胞外囊泡:形态及组分 研究 2022-07-08 10:59 来源: 【Extracellular Vesicle】机械挤压法制备的纳米囊泡对比自然分泌的胞外囊泡:形态及组分已关闭评论 1 细胞外囊泡(EV)是细胞分泌的脂质双层包裹的颗粒。这些细胞来源的天然EV (natural EV, nEV)可用作药物载体来递送药物。与胶束、脂质体、聚合物纳米颗粒相比,nEV作为天然的递送系统,具有低免疫原性。还可与受体细胞膜融合,避开溶酶体吞噬,将药物直接输送到细胞质中,从而显著提高蛋白、核酸药物的输送效率。此外,干细胞分泌的nEV携带有母体干细胞的蛋白、核酸,目前也被尝试用于组织修复和再生。nEV用于药物递送及组织修复再生的前景良好,但nEV的自然产率极低。为了获得足够数量的nEV,需要大量的细胞和较长的培养周期,导致高生产成本,进而影响相关临床转化。近年来研究发现,通过破坏细胞(如机械挤压、超声、冻融等处理),可获得纳米尺寸的,外观及结构类似于nEV的囊泡(cell-derived nanovesicles, CNV)。但CNV的产率是nEV的50-100倍,生产成本不到nEV的10%。作为nEV的廉价替代品,CNV在药物递送和再生医学中的作用也已得到证实。但一个基本问题尚未被确认,即CNV和nEV到底有多相似?现有研究仅仅证明两者都是纳米级的脂质双层封闭囊泡,都携带经典的EV蛋白标记物。但两者携带的蛋白、核酸有多相似,还未有相关研究。近日,宾汉姆顿大学万源和南京医科大学附属无锡人民医院毛文君课题组,在ELSEVIER旗下的学术期刊Extracellular Vesicle上发表文章,研究者基于高通量测序对两者的蛋白及小RNA(small RNA, smRNA)进行了比较(图1)。同过往研究结论一样,该研究证实nEV和CNV在大小并无显著区别,蛋白印迹也发现两者都携带经典EV蛋白标志物。一些参与免疫调节的蛋白,如CD55, CD44, CD5,MHC-I等,均在两者中检测到(图2)。nEV的排他性标志物,如细胞色素C,钙联结蛋白,组蛋白,在nEV中检测不到。挤压获得的CNV携带有微量细胞色素C,但未见钙联结蛋白和组蛋白。后续的蛋白质谱分析中也为发现钙联结蛋白和组蛋白。 图1 实验流程
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