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2024-04-08 22:20| 来源: 网络整理| 查看: 265

5'-核苷酸酶

5'-核苷酸酶( EC 3.1.3.5 )是一种催化5'核苷酸磷酸裂解的酶。[2]虽然最初在蛇毒中发现,[3] 5'核苷酸酶的活性已被描述为细菌和植物细胞,并广泛分布在脊椎动物组织中。[4]在哺乳动物细胞中,该酶主要位于质膜中,其主要作用是将通常不可渗透的细胞外核苷酸(例如 5'-AMP)转化为相应的核苷(例如腺苷),该核苷很容易通过进入大多数单元格。[5]因此,该酶在核苷酸代谢中起着关键作用。

该酶对核苷酸具有广泛的底物特异性,并且已被证明可以快速水解 5'核苷酸,缓慢水解 5-磷酸核糖,以及极其缓慢地水解其他磷酸酯(如果有的话)。[6]

对不含GPI锚的人外源 5' 核苷酸酶的可溶性形式的研究表明,C 端结构域包含底物结合口袋,并且底物的芳香嘌呤基序堆叠在两个苯丙氨酸残基之间。[10]此外,已经提出了一种催化机制,涉及由羟基部分的在线亲核攻击,该部分与底物磷上的锌配位,核苷作为离去基团。[10]

对哺乳动物 5' 核苷酸酶的研究表明,至少存在四种不同形式的 5' 核苷酸酶:一种膜结合形式和三种可溶性形式。[4]膜结合形式通过 GPI 在其 C 端锚定在质膜上。[4]一种可溶性形式似乎源自 GPI 锚定的 ex-5'-核苷酸酶,并具有细胞外位置。[4]该酶的两种胞质形式具有相似的特征,但可以根据它们对核苷酸底物的优先亲和力进行区分。[4]GPI 锚定形式作为二聚体存在,两个亚基通过二硫键连接。可溶形式可以二聚体或四聚体形式存在。通常至少 50% 的酶以表面结合形式存在。[4]

血液中 5' 核苷酸酶蛋白的浓度通常用作显示肝脏问题迹象的个体的肝功能测试。血清 5' 核苷酸酶和碱性磷酸酶(AP) 活性的联合检测对鉴别诊断非常有帮助,因为血清 5' 核苷酸酶活性在阻塞性肝胆疾病中增加,但在骨性疾病中没有增加,而血清 AP 活性通常在两种类型中都增加的疾病。[11]换句话说,该测试用于确定蛋白质水平升高是由于骨骼损伤还是肝脏损伤。[12] 5'核苷酸酶的正常水平为每升2-17个单位。[13]水平升高可能表明胆汁淤积、肝细胞破坏、肝炎(肝脏炎症)、肝脏缺血、肝脏肿瘤或使用损害肝脏的药物。怀孕和某些药物(对乙酰氨基酚、氟烷、异烟肼、甲基多巴、呋喃妥因)可能会干扰测试。[12] [13]

该测试也可称为 5'NT 水平血液测试、CDF73 水平血液测试和 Ecto-5'-核苷酸酶水平血液测试。[12]

AMP + H 2 O腺苷 + 磷酸盐 ⇌ {\displaystyle \rightleftharpoons } 5' 核苷酸酶与抑制剂腺苷的活性位点结构[10] 哺乳动物 5' 核苷酸酶的膜结合和可溶性形式的卡通示意图


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