斑马鱼染色体显带技术及染色体进化探讨

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作者：

周菲

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摘要：

斑马鱼(Danio rerio)是研究脊椎动物发育生物学的重要模式物种之一.本文对斑马鱼染色体多重带显带技术进行了详细的探讨;通过染色体描绘技术对斑马鱼染色体与人类17号染色体进行了比较研究,同时采用荧光原位杂交(FISH)技术对3个基因进行了染色体定位研究. 采用碱性低渗结合高氯仿一步显带技术获得了斑马鱼二价体G带高分辨多重带,带纹丰富,反差明显.以及采用地高辛为标记的以限制性内切酶Alu Ⅰ导的原位切口平移技术得到斑马鱼二价体类G带的多重带,获得了明暗反差强烈的带纹结果.通过比较多个不同分裂相的多条染色体,发现带纹分布具明显特征性,特征一致,带纹数目基本吻合.并首次从方法学上对斑马鱼二价体的制备过程及多重带显带技术进行了分析,探讨和小结,力求将该技术程序化,规范化,使其具有可重复性和可操作性,同时探讨了显带的可能机制,对进一步开展斑马鱼等鱼类的细胞遗传学研究及对构建斑马鱼基因组物理图谱的精细框架具有一定的参考价值. 用人类17号染色体的特异DNA探针对斑马鱼染色体组进行了描绘,描绘出了3个保守同线群,分别位于斑马鱼12号染色体(sm4)长臂,相对于着丝粒距离为35.9±0.87;17号染色体(sm8)短臂,相对于着丝粒距离为40.5±0.78;22号染色体(sm12)长臂,相对于着丝粒距离为34.3±0.33. 同时还将生长激素基因GH,杆细胞磷酸二酯酶γ亚单位(PDEG)基因以及胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)基因,以荧光原位杂交(FISH)方 法,定位于斑马鱼染色体上:将GH基因定位于12号染色体(Sm4)长臂, 相对于着丝粒距离为35.5士0.77;G壬罕A尸基因定位于12号染色体(Sm4)长 臂,相对于着丝粒距离为30.3士0.98:PDEG基因定位于17号染色体短臂, 相对于着丝粒距离为40,1士1.01.这一定位结果,进一步证实了人17号染 色体,猪12号染色体和斑马鱼的12号,17号,22号间存在有保守同线群 这一结论,同时也为染色体进化过程中的保守性提供了新的依据.并且根 据本研究结果以及前人的研究成果,进一步论证了"板块转移集中构成" 的染色体进化观点.

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关键词：

斑马鱼 显带技术 基因定位 染色体描绘 染色体进化

被引量：

1