实时荧光定量PCR TaqMan 探针

Applied Biosystems™ TaqMan™ MGB探针为实时荧光PCR应用提供了业界领先的特异性和灵敏度，长期以来被认为是qPCR的金标准。我们使用最高质量的专有原材料生产MGB探针已有20多年的历史，并一直在不断完善独特的制造工艺，旨在为您提供研究所依赖的质量和性能。

TaqMan MGB探针通过NFQ基团淬灭另一端荧光报告基团所产生的信号。因MGB探针长度较短，TaqMan MGB探针本底信号低于非MGB NFQ探针。更低的本底信号意味着更高的灵敏度和精确度(表1)。

TaqMan MGB探针是双标记探针，探针的5'端标记有荧光报告基团，3'端标记有非荧光淬灭基团(NFQ)。与其他以探针为基础的化学物质不同的是，TaqMan MGB探针3'端包含了一个小沟结合物(因此命名为“MGB”)部分，可以增加探针的熔解温度(Tm)并稳定探针与靶标的复合物。因此，TaqMan MGB探针明显短于传统探针，可提供更好的序列鉴别能力和灵活性，以适应更多的靶标。

表1. TaqMan MGB探针提供更佳灵敏度和精确度。使用Applied Biosystems TaqMan基因表达MGB检测或非MGB检测在11个重复的实时荧光PCR反应中制备和分析10倍稀释的通用人参比 RNA(10–10–5 ng)。在跨越6个数量级的起始模板的所有数据点中，TaqMan MGB检测的Ct值更低，再现性更好。此外，TaqMan MGB检测的信号更高，本底更低，因此灵敏度更佳。

Applied Biosystems™ TaqMan™ QSY探针是TaqMan MGB探针在单管多重实验中的完美补充。QSY为不发光的3'淬灭基团，无本底荧光干扰，从而提升淬灭效果和检测灵敏度，同时帮助您充分提高多重检测应用PCR反应性能。多重检测能够节约成本并节省有限的样品，利用QSY探针方案能在单管4-重反应中获得与单管单重一致的结果(见图1)。

图1. 单重反应的结果与多重检测的结果相近。扩增图显示了使用4个EGFR探针进行单重检测(蓝色)和单管4重(红色)检测扩增的检测曲线。

TaqMan QSY探针也是直接转换BHQ探针设计的理想选择，无需改变序列即可直接从BHQ探针无缝转换。可搭配FAM、VIC以及我们专有的ABY和JUN染料，允许在一次反应中扩增多达4个目标。所有4种染料都针对QuantStudio系列系统上的滤光片组进行了优化，确保最小的光谱重叠，以获得最佳性能(见图2)。

图2. 采用多重荧光定量PCR检测时的荧光发射波长。FAM、VIC、ABY、JUN四种染料的相对发射光谱。

Applied Biosystems™ TaqMan™ TAMRA探针以TAMRA作为3'端淬灭基团。TAMRA是最早被开发用于TaqMan探针的淬灭基团。我们将持续供应，以支持相关应用。