免疫沉淀法疑难排解指南

有几种方法避免这种后果：

来自不同物种的抗体用于 IP 和蛋白质印迹法。例如，兔抗体用于 IP 而小鼠抗体用于蛋白质印迹法，或反之亦然。请注意，二抗需有物种特异性。我们的检验已经用 Anti-rabbit IgG，HRP-linked Antibody #7074 和 Anti-mouse IgG，HRP-linked Antibody #7076 进行，这些抗体分别对兔和小鼠高度特异。我们未随这些二抗观察到物种交叉反应性。

来自相同物种的生物素化一抗用于蛋白质印迹法。然后可以使用不会与变性 IgG 交叉反应的 Streptavidin-HRP #3999 检测生物素化抗体。

如果您的靶标在 25 kDa 附近没有迁移，则可以使用轻链特异性二抗。CST 提供 Mouse Anti-Rabbit IgG (Light-Chain Specific) (D4W3E) mAb (HRP Conjugate) #93702 和 Rabbit Anti-Mouse IgG (Light Chain Specific) (D3V2A) mAb (HRP Conjugate) #58802。

使用优先结合天然 IgG 的我公司 Protein A (HRP Conjugate) #12291 替换蛋白质印迹法中的二抗。但是，重点提示，#12291 可能与高浓度的变性 IgG 交叉反应。

构象特异性二抗用于蛋白质印迹法。CST 提供优先结合天然构象下 IgG 的 Mouse Anti-Rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #5127。但是，重点提示，#5127 也可能与高浓度的变性 IgG 交叉反应。