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用微信扫码二维码 分享至好友和朋友圈 来源:检验学姐笔记 9.红细胞计数操作方法 牛鲍氏计数板 总结:计数池内有长、宽各3.0mm的方格,分为9个大格,每个大格面积为1.0mm2,容积为0.1mm3(μl)。 中央大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角的5个中方格是红细胞和血小板计数区域。每个中方格用单线分为16个小方格。 四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格。 微量吸管----水银称重校正 压线红细胞计数原则:数上不数下,数左不数右 公式:RBC=5个中方格内红细胞数×5×10×106×200 ×5(5个中方格换算成1个大方格) ×10(1个大方格容积为0.1μl,换算成1.0μl) ×200(稀释倍数) ×106(由1μl换算成1L) 红细胞稀释液:①Hayem液由NaCl(调节渗透压)、NazS04(提高比密防止细胞粘连)、HgCl(防腐)和蒸馏水组成, 缺点:遇高球蛋白血症患者,由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。 ②枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。 10.血红蛋白测定 检测原理 ①氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法:可检测血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种Hb,被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白,在540nm处测定吸光度,经换算得到血红蛋白浓度。 本法为参考方法,但是不是常用方法,缺点:剧毒 ②十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS)测定法:血液中除SHb外的各种Hb均可与低浓度SDS作用,在538nm处测定吸光度,经换算得到血红蛋白浓度。 缺点:不能直接用吸光度计算 优点:无公害 ③叠氮高铁血红蛋白法(HiCN):542nm,毒性为HiCN1/7. ④溴代十六烷基三甲铵血红蛋白测定法(CTAB):缺点:准确度和精密度不佳 质量控制 ①HiCN贮存转化液应贮存在棕色有塞玻璃瓶中,不能贮存在塑料瓶中,否则会使CN丢失,测定结果偏低。HiCN转化液在4℃保存一般可数月,不能在0℃以下保存,因为结冰可使高铁氰化钾还原,试剂失效。 ②氰化钾试剂是剧毒品,测定后的废液首先以水稀释废液(1:1),再加次氯酸钠35m1/L,充分混匀,放置15小时以上,使CN氧化成CO2和N2挥发,或水解成CO2和NH2再排入下水道。 废液不能直接与酸性溶液混合,因为氰化钾遇酸可产生剧毒的氰氢酸气体。 参考值 男性120〜160g/L;女性110〜150g/L;新生儿170〜200g/L 11.红细胞形态检查 异常红细胞形态 缺铁性贫血HB下降速度>RBC下降速度 巨幼细胞贫血HB下降速度< RBC下降速度 正常红细胞双凹圆盘形、大小一致,平均直径为7.2μm,淡粉红色,中央1/3为生理性淡染区,胞质内无异常结构 ①小红细胞----直径10μm------巨幼细胞贫血、溶血性贫血 ③红细胞大小不均-------巨幼细胞贫血 ④巨红细胞 -----直径>15μm----巨幼细胞贫血及肝、脾切除术后 血红蛋白含量改变 ①正常色素性:淡粉红,中央有生理性淡染区。②低色素性:淡染区扩大,形成环形红细胞。 形态改变 ①球形红细胞————遗传性和获得性球形细胞增多症 ②椭圆形红细胞————遗传性椭圆形细胞增多症(25-75%)、大细胞性贫血等(<25%),正常人 /阅读下一篇/ 返回网易首页 下载网易新闻客户端 |
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