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【必备】一文带你全方位了解拉曼光谱Raman(基础知识、仪器、应用)

2024-07-08 01:43| 来源: 网络整理| 查看: 265

拉曼光谱使用什么波长的激光器?

从紫外、可见到近红外波长范围内的激光器都可以用作拉曼光谱分析的激发光源,典型的激光器有(不限于):

紫外:244 nm,257 nm,325 nm,364 nm

可见:457 nm,488 nm,514 nm, 532 nm,633 nm,660nm

近红外:785 nm,830 nm,980 nm,1064 nm

激光波长的选择对于实验的结果有着重要的影响:

1.灵敏度:拉曼散射强度与激光波长的四次方成反比,因此,蓝/绿可见激光的散射强度比近红外激光要强15倍以上。

 

2.空间分辨率:在衍射极限条件下,激光光斑的直径可以根据公式计算得出,其中是激发激光的波长,是所使用显微物镜的数值孔径。例如,采用数值孔径为0.9的物镜,波长532 nm激光的光斑直径理论上可以小到0.72微米,在同样条件下使用785 nm波长激光时,激光光斑直径理论上最小值为1.1微米,因此,最终的空间分辨率在一定程度上取决于激发激光的选择。

 

3.可以基于样品特性对激发波长进行优化:激发光波长的选择一般是为了避开荧光的干扰,因为拉曼位移与激发光频率无关,不同物质产生荧光的范围不同,只要能避开该物质的荧光带的激发光都是可以的。例如,蓝/绿色激光(440-565 nm)适合无机材料和共振拉曼实验(如碳纳米管和其它碳材料)以及表面增强拉曼实验(SERS);红色和近红外激光(660-830nm)适合于抑制样品荧光;紫外激光适合生物分子(蛋白质、DNA、RNA等)的共振拉曼实验以及抑制样品荧光。

 

4. 拉曼与红外光谱的比较

拉曼光谱与红外光谱都能获得关于分子内部各种简正振动频率及有关振动能级的情况,从而可以用来鉴定分子中存在的官能团。但两者产生的原理和机制都不同,在分子结构分析中,拉曼光谱与红外光谱相互补充,一些在红外光谱无法检测的信息在拉曼光谱能很好地表现出来。

红外光谱侧重于检测基团,适用于极性键,多用于测有机物,拉曼光谱检测分子骨架,适用于非极性键,有机无机均可测试。



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