CYP2D6动物模型:如何诱导小鼠自身免疫性肝炎

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作者：

Edith Hintermann，Janine Ehser，Urs Christen

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摘要：

自身免疫性肝炎是一种罕见但危及生命的自身免疫性疾病的病因不明肝脏.在过去的许多尝试已作出生成一个动物模型,反映了人类疾病的特点然而,在各种型号的感应疾病是相当复杂的,往往肝炎只是短暂的因此,我们已经开发出一种简单的小鼠模型,在2型自身免疫性肝炎(AIH的-2),即hCYP2D6,使用人类的主要自身抗原作为触发1型肝肾微粒体抗体(LKM-1)抗体承认hCYP2D6例AIH-2 标志. hCYP2D6交付是由腺病毒结构(AD-2D6),确保触发肝抗原直接传送到野生型FVB或C57BL / 6小鼠.因此,随之而来的局部炎症产生的自身免疫性疾病的后续发展肥田一个CAD-2D6 ombination静脉注射和腹腔注射是最有效的途径,诱发一种持久的自身免疫性损害肝脏(1节).在这里,我们提供了一个如何在CYP2D6模型诱导自身免疫性肝病和肝功能损害的不同方面如何可以评估的详细协议.首先,表明肝细胞的破坏,如转氨酶以及hCYP2D6抗体的滴度的血清标记确定采样的血液retroorbitaly(第2节).其次,在hCYP2D6特异性T细胞反应的特点是通过收集脾淋巴细胞和肝脏.为了获得纯的肝细胞,肝脏灌注通过门静脉(第3)胶原蛋白和消化,通过Percoll梯度(第4)纯化,用PBS.分析与刺激hCYP2D6肽和鉴定流式细胞仪检测细胞IFNγ的生产(第5条)的hCYP2D6特异性T细胞的频率.第三,由肝部分(第6条)免疫组化细胞浸润和纤维化.这样的分析方案,以证明该模型的长期性疾病开始后要进行多次.特点是数量级的频率和hCYP2D6特异性T和/或B细胞的活性和肝损伤和肝纤维化程度的免疫反应,被评价为后续可能的治疗,以防止,延缓或废除autodestructive评估肝脏的过程.

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