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摘要：

目的·探索6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）诱导的帕金森病小鼠模型是否具有衰老表现及胶质细胞的衰老变化。方法·将30只雄性9~10月龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham组）和6-OHDA组，每组15只。通过6-OHDA纹状体立体定位注射建立帕金森病模型。采用阿扑吗啡诱导的旋转实验、转棒实验评估小鼠造模后第21日的神经功能损伤情况；末次行为学实验后，取小鼠脑组织，通过蛋白质印迹法检测脑组织纹状体及黑质区域酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）蛋白含量；免疫荧光染色观察纹状体及黑质区域衰老标志物p16Ink4a、p21的表达变化以及胶质细胞、衰老标志物双阳性的细胞数量变化；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测纹状体及黑质区域的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p16Ink4a、p15Ink4b、p19Ink4d、p21和p27Kip1，以及衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype， SASP）包括Cxcl10、Ccl2、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，Tnf-α）、白介素1α（interleukin-1 α，Il-1α）、Il-1β、Il-6、基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase 3，Mmp3）的表达及变化。结果·转棒实验结果显示，与Sham组相比， 6-OHDA组小鼠在转棒上的停留时间较短（P=0.000）；阿朴吗啡诱导的旋转实验结果显示，与Sham组相比，6-OHDA组小鼠总旋转次数较多（P=0.000）；蛋白质印迹法检测结果显示，6-OHDA组纹状体及黑质区域TH蛋白表达量均显著低于Sham组（均P=0.000）。以上结果证实6-OHDA单侧纹状体小鼠帕金森病模型成功建立。免疫荧光染色结果显示：6-OHDA组纹状体和黑质区域p16Ink4a阳性细胞数量增多；p21在2组均无明显表达；6-OHDA组同时伴有衰老的星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞产生，且星形胶质细胞数量大于少突胶质细胞和小胶质细胞（均P 引用本文

袁笑, 田野野, 薛峥. 6-OHDA诱导的帕金森病小鼠表现出以p16Ink4a上调和星形胶质细胞衰老为特征的衰老表型[J]. 上海交通大学学报(医学版), 2021, 41(7): 876-883.

Xiao YUAN, Ye-ye TIAN, Zheng XUE. 6-OHDA-induced Parkinson disease mice exhibit senescent phenotypes characterized by upregulation of p16Ink4a and astrocyte senescence[J]. JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCE), 2021, 41(7): 876-883.

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