实验指南

2024-07-03 16:15| 来源: 网络整理| 查看: 265

引言

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）是一种常见的微生物学基础培养基，由马铃薯浸出液和葡萄糖制成，用于真菌的生长。PDA被APHA和FDA推荐用于食品和乳制品中酵母和霉菌的平板计数。它是一种适用于酵母和霉菌的通用培养基，可通过添加酸或抗生素（如氯霉素、酒石酸和四环素）作为选择性抑制剂来抑制细菌生长，从而促进真菌生长。PDA可用于培养具有临床意义的酵母和霉菌，并且对于保存某些皮肤真菌的菌种库也非常有用。

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）的成分组成

• 马铃薯，来源于其浸出液：200.0 克/升

• 葡萄糖：20.0 克/升

• 琼脂：15.0 克/升

最终pH值（在25°C下）应为5.6±0.2。

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）的原理

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）的原理在于：它含有葡萄糖作为碳水化合物来源，能够刺激生长；马铃薯浸出液提供了丰富的营养基础，促进大多数真菌的茂盛生长；琼脂则作为凝固剂使培养基固化。为了抑制细菌生长，可加入一定量的灭菌酒石酸（10%），将培养基的pH值调至3.5。

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）上的结果解读

酵母菌会形成乳白色至白色的菌落。

霉菌则会长成各种颜色的丝状菌落。

以下是在马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）上某些真菌的菌落形态特征：

白曲霉（Aspergillus candidus）：菌落质地为绒状厚实，表面呈乳白色，背面稍带乳色，背面有径向沟纹，产孢量为中等。

黑曲霉（Aspergillus niger）：菌落质地绒状，初为白色带有典型的黑色孢子，背面为黄色，背面重度沟纹，产孢旺盛。

硫磺菌（Aspergillus sulphureus）：菌落质地绒状，中心为灰白并带有黄色孢子，背面呈橙色至巧克力色，略呈径向沟纹，产孢量中等。

榛曲霉（Penicillium corylophilum）：菌落质地绒状，深绿色，背面无色至乳白色，中央凹陷边缘呈径向沟纹隆起，产孢中等。

扩展青霉（P. expansum）：菌落质地绒状，深绿色带有明显无菌白色边缘和清晰渗出物，背面黄色，具径向沟纹，产孢旺盛。

尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）：菌落为絮状，品红色，背面品红转紫罗兰色，具有深浅不一的红色环纹，产孢量少。

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马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）的用途

用于检测乳制品和即食食品中的酵母菌和霉菌。

可用于从临床样本中培养酵母菌和霉菌。

添加了TA（酒石酸）的PDA推荐用于食品和乳制品的微生物检验。

添加了四环素的PDA建议用于化妆品中酵母菌和霉菌的微生物计数。

添加了氯霉素的PDA推荐用于从混合样本中选择性培养真菌。

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）的局限性

PDA的局限性在于，虽然它能有效支持多种酵母和霉菌的生长，但为了获得菌种的完整鉴定，建议对纯培养菌落进行生化、免疫学、分子生物学或质谱分析等进一步的测试。这意味着仅凭PDA上的菌落特征可能不足以完成微生物的最终鉴定。

总结

马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）是一种广泛应用的微生物培养基，特别适合真菌如酵母和霉菌的培养与鉴定。它由马铃薯浸出液、葡萄糖及琼脂组成，提供丰富的营养和适宜的生长环境，pH值调整至5.6±0.2以优化真菌生长条件。PDA可通过添加特定抑制剂如抗生素或酸类，实现对细菌生长的抑制，从而促进真菌的纯培养。不同真菌在此培养基上展现出独特的菌落形态特征，如颜色、质地及结构，这对于初步识别菌种至关重要。

PDA在多个领域发挥着重要作用，包括食品、乳制品的安全检测，临床样本中真菌的分离培养，以及化妆品微生物监测等。然而，尽管PDA在促进真菌生长和提供菌落形态学信息方面效果显著，其鉴定能力存在局限性，不能单独作为菌种精确鉴定的依据。完整的微生物鉴定需结合生化、免疫学、分子生物学或质谱分析等高级技术手段。因此，马铃薯葡萄糖琼脂是一个基本但强大的工具，是微生物学研究和应用中不可或缺的一部分，尤其是在真菌学领域。