基于网络药理学探讨参苓白术散治疗肿瘤恶病质的作用机制研究

肿瘤相关恶病质会使患者虚弱，难以接受进一步的治疗，且几乎没有有效的治疗方法[13]。恶病质不仅发生在癌症晚期，许多早期癌症也可能发生恶病质。恶病质降低了患者机体对药物、射线等抗肿瘤治疗反应的敏感性与耐受性，直接影响肿瘤治疗效果，且会增加并发症，缩短癌症患者的生存期[14]。恶病质的特征是全身炎症和多器官消耗紊乱，伴随着体重减轻，特别是脂肪组织和骨骼肌的质量减少[15-16]。目前尚不清楚恶病质的发病机制，多认为是由于厌食症、全身系统性炎症、能量代谢异常和信号通路等相互作用造成的[17-19]。中医药辅助治疗不仅可以针对肿瘤进行治疗，同时可改善晚期恶性肿瘤患者体倦乏力、食少纳呆等脾虚现象，以及放、化疗引起的胃肠道不适等不良反应。郭东霖等[20]对中药汤剂治疗肿瘤恶病质疗效进行meta分析，结果显示，中药汤剂对肿瘤恶病质的治疗有一定的疗效，且不良反应较小。

以益气健脾为治法的参苓白术散联合放、化疗治疗肺癌、胃癌、结直肠癌，不仅能提高对肿瘤的治疗效果，还能增强机体免疫力，改善化疗后的毒副作用，提高患者生活质量[21-24]。本研究通过网络药理学初步筛选出参苓白术散治疗肿瘤恶病质的主要活性成分为槲皮素、山奈酚、木蜡酸、豆甾醇、木犀草素、β谷甾醇等。相关研究表明，槲皮素可能通过影响脂肪的消化吸收、甘油磷脂代谢、SCAP-SREBP2-LDLr信号通路等改善脂质代谢[25]，同时可以直接或间接作用于脂多糖，抑制脂多糖诱导产生TNF-α，进而抑制机体炎症[26]。山柰酚可增强脂肪分解并减少高级脂肪酸及受损葡萄糖的摄取、糖原合成、AMPK活性以及葡萄糖转运蛋白4的表达[27]，可下调炎症通路蛋白的表达[28]。豆甾醇通过下调NF-κB P65的表达来抑制促炎介质(TNF-α，IL-6，IL-1β等)的表达，增加抗炎细胞因子(IL-10)的表达[29]。木犀草素能借助AMP活化蛋白激酶1信号传导，降低THP-1细胞衍生的巨噬细胞中总胆固醇水平，同时抑制巨噬细胞趋化因子和炎性细胞因子表达[30]。研究表明，槲皮素、山奈酚、豆甾醇三种成分作为抗癌候选药，可通过调节多种生物途径，以诱导和促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管新生、防止肿瘤细胞增殖的方式抑制肿瘤的发展[31-34]。

KEGG通路富集分析发现，参苓白术散治疗肿瘤恶病质作用的通路可分为3个方面。一是抑制炎症，改善食欲。肿瘤生长增加了血浆色氨酸浓度，大脑中色氨酸浓度增加可引起下丘脑腹内侧核5-羟色胺能神经元活性增强，从而增强下丘脑厌食神经元的活性[35]。IL-1β、TNF-α、IL-6等细胞因子在厌食症发病过程中起到重要作用，促进了厌食症的发生和发展。参苓白术散可能通过作用于血清学突触、多巴胺能突触、HIF-1信号通路、雌激素信号等通路，抑制炎症因子产生，降低5-羟色胺能神经元活性，从而促进食欲。二是作用于代谢相关通路，纠正肿瘤恶病质机体能量恶性消耗、代谢紊乱的状态。如糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、脂肪细胞脂解调节、PPAR信号通路等与脂肪代谢有关的通路。糖化应激通过AGEs与RAGE结合，诱导炎症和氧化应激，研究表明，AGE-RAGE可介导高胆固醇血症引起的动脉粥样硬化等多种病变，并且sRAGE水平与HDL呈正相关[36]。PPAR通路中，PPAR家族调控参与细胞增殖、分化以及炎症和免疫相关蛋白的表达，同时也是参与调控脂肪细胞分化和葡萄糖稳态的关键细胞因子[37]。推测参苓白术散通过这些通路修复肿瘤恶病质所致的高甘油三酯和低胆固醇症等。HIF-1 信号通路是治疗肿瘤具有潜在价值的通路，抑制PIK3/Akt-HIF-1α途径能够显著减少多种细胞的糖酵解[38]，而糖酵解正是恶性肿瘤细胞获取能量的主要方式，也是造成糖代谢紊乱的原因。HIF-1α蛋白升高诱导瘦素信号通路，从而增强白色脂肪组织储存的脂肪分解[39]。三是直接作用于肿瘤相关的通路（癌症中的通路、癌症中的蛋白多糖、Wnt信号通路），抑制肿瘤活性。刘羽茜等[40]通过网络药理学研究发现，参苓白术散作用涉及到肺癌的多种信号通路，其通过调节相关信号通路从而抑制炎症因子的活化，缓解机体过激的免疫反应，发挥对肺癌的治疗作用。田婷婷等[41]运用网络药理学探索参苓白术散治疗结直肠癌作用机制，发现其可能通过调节炎性反应、优化肠道菌群结构发挥治疗作用。参苓白术散基础方四君子汤治疗恶病质的作用[42]与本研究中参苓白术散调节代谢和抑制肿瘤的作用基本一致，参苓白术散在四君子汤基础上添加的药物，增加了抗击炎症和增强食欲的作用。

研究结果表明，参苓白术散同一活性成分可调控不同靶点，而同一靶点可干预不同的生物学过程及信号通路。分子对接结果显示，排名前10的活性成分和靶点之间存在较好的结合活性，具有良好的相互作用，体现了参苓白术散多通路、多靶点联合作用的特点，为参苓白术散临床运用提供了科学依据，也为挖掘参苓白术散潜在作用机制提供新方向。本研究主要是以生物信息学与海量数据计算的结果为基础，后续将在此基础上进一步进行动物或细胞实验验证，进而明晰参苓白术散的主要调控靶点。