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GPC分析技术，总有你不知道的！
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GPC——分子量及其分布 主要用于聚合物领域； 以有机溶剂为流动相（氯仿，THF，DMF）； 常用固定相填料：苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。
基本原理 GPC是一种特殊的液相色谱，所用仪器实际上就是一台高效液相色谱（HPLC）仪，主要配置有输液泵、进样器、色谱柱、浓度检测器和计算机数据处理系统。 与HPLC最明显的差别在于二者所用色谱柱的种类（性质）不同：HPLC根据被分离物质中各种分子与色谱柱中的填料之间的亲和力而得到分离，GPC的分离则是体积排除机理起主要作用。 当被分析的样品通过输液泵随着流动相以恒定的流量进入色谱柱后，体积比凝胶孔穴尺寸大的高分子不能渗透到凝胶孔穴中而受到排斥，只能从凝胶粒间流过，最先流出色谱柱，即其淋出体积（或时间）最小；中等体积的高分子可以渗透到凝胶的一些大孔中而不能进入小孔，比体积大的高分子流出色谱柱的时间稍后、淋出体积稍大；体积比凝胶孔穴尺寸小得多的高分子能全部渗透到凝胶孔穴中，最后流出色谱柱、淋出体积最大。
因此，聚合物的淋出体积与高分子的体积即分子量的大小有关，分子量越大，淋出体积越小。分离后的高分子按分子量从大到小被连续的淋洗出色谱柱并进入浓度检测器。
GPC标定方法 GPC 需要通过标定曲线计算高分子相对分子质量, 所以标定曲线的准确与否直接影响分析结果。检测方法可大致分为两大类, 即间接测定法和直接测定法[3]。间接法是由淋洗体积(V)与高分子（聚合物）相对分子质量(M) 间的关系( lgM-V) , 来间接测定聚合物相对分子质量及其分布。主要有以下几种标定方法: 窄分布标样校正法、渐进试差法、普适校正法、无扰均方末端距标定法及有扰均方末端距标定法[4] 。直接法可分为粘度法、光散射法。 GPC操作指南 谱图的表示方法：柱后流出物浓度随保留值的变化 提供的信息：高聚物的平均分子量及其分布。根据所用凝胶的性质，可以分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法（GFC）和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法（GPC）。
只依据尺寸大小分离，大组分最先被洗提出
色谱固定相是多孔性凝胶，只有直径小于孔径的组分可以进入凝胶孔道。大组分不能进入凝胶孔洞而被排阻，只能沿着凝胶粒子之间的空隙通过，因而最大的组分最先被洗提出来。
直径小于孔径的组分进入凝胶孔道
小组分可进入大部分凝胶孔洞，在色谱柱中滞留时间长，会更慢被洗提出来。溶剂分子因体积最小，可进入所有凝胶孔洞，因而是最后从色谱柱中洗提出。这也是与其他色谱法最大的不同。
依据尺寸差异，样品组分分离
常见问题解答
1. 溶剂的选择
能溶解多种聚合物；不能腐蚀仪器部件；与检测器相匹配。
2. 把激光光散射与凝胶色谱仪联用
在得到浓度谱图的同时，还可得到散射光强对淋出体积的谱图，从而计算出分子量分布曲线和整个试样的各种平均分子量。
3. 样本的准备
激光光散射实验中必须对样品严格除尘。溶液除尘是光散射成败的关键。首先是溶剂除尘，配置测试样品的溶剂应进行精馏，并经过0.2μm超滤膜过滤后方可使用。配好的溶液也要用0.2μm的超滤膜过滤。另外，测试中所用的器械，如：注射器等，使用前要用洗液浸泡，清水强力冲洗。
4. GPC色谱柱的选择
（1）按照样品所溶解的溶剂来选择柱子所属系列
THF、氯仿、DMF
必须选择合适的溶剂来溶解聚合物。
（2）按照样品分子量范围来选择柱子型号
样品分子量应该处在排阻极限和渗透极限范围内，并且最好是处在校正曲线线性范围内。
5. GPC仪器对载体的要求
（1）良好的化学稳定性和热稳定性
（2）有一定的机械强度
（3）不易变形
（4）流动阻力小
（5）对试样没有吸附作用
（6）分离范围越大越好(取决于孔径分布)等
（7）载体的粒度越小，越均匀，堆积的越紧密，色谱柱分离效率越高。
6. 进样体积
50~100μL之间(浓度在0.05%~0.5%之间)
7. GPC系统如何平衡
（1）安装色谱柱之前，用两通管连接管路，用流动相替换系统后换上GPC柱子(注意溶剂互溶情况)。
（2）RID平衡操作
分析开始前，用流动相冲洗检测器流路。
流动相流速1mL/min，切换到R Flow，使流动相通过检测池的样品池和参比池，冲洗20min左右。
然后切换R Flow流路数次，将气泡赶出检测池。
关闭R Flow，等待基线平稳。
当Balance值高于50，进行Balance调整。
（3）色谱柱平衡
等溶剂峰出峰后再经过约一次分析时间后，基线才能走平。
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