GraphPad Prism 10 Curve Fitting Guide

X值为浓度或剂量的对数时，使用该方程。X值为浓度或剂量时，使用相关方程。

许多剂量反应曲线遵循熟悉的S形。这些曲线通常由四项参数定义：顶部、底部、Hill斜率和EC50（或IC50）。“顶部”和“底部”参数描述了曲线达到稳定段的值 - 无限接近，但从未完全达到这些值。Hill斜率描述了这两个稳定段之间的S形曲线的斜率。EC50（或IC50）是指将测得反应增加（或减少）至其最大值的一半或50%所需的激动剂（或拮抗剂）浓度。

但有许多方法可解读该“一半”的概念。您是否对导致曲线的最大（顶部）值与最小（底部）值之间一半的测得反应的浓度感兴趣？或者，您是否想要导致曲线的最大（顶部）值与某个已定义的“基线”控制值之间一半的测得反应的浓度？

在考虑到抑制性数据（测得反应随着拮抗剂浓度增加而降低）时，这两个值 分别称为“相对IC50” 和 “绝对IC50”。

这是迄今为止最常见的定义，通常是人们所说的反应的“IC50”。其是使曲线降至曲线顶部与底部稳定段之间一半的点所需的浓度。除非将数据标准化为从0运行至100，否则这 不对应Y轴上50%的值。

在空白（无拮抗剂，最大测定反应）和一些阳性对照品（代表完全抑制反应）之间引起一半反应的浓度有时称为绝对IC50。在许多情况下，所使用的阳性对照品可能是一种不同的标准药物，已知这种药物会对测定反应产生最大的抑制作用。通常，该标准阳性对照品的测定反应低于剂量反应曲线的“底部”。因此，绝对IC50和相对IC50 会不一样。

在某些情况下，根本无法计算绝对IC50。例如，所测定的拮抗剂可能只能够将测定反应降至其最大（空白）值的60%，但无法进一步降低。在此情况下，不会定义绝对IC50（任何拮抗剂浓度的增加均无法将测定反应降至其最大反应的50%）。务必清楚您想要报告哪个IC50，以及您的数值含义。

在此阅读更多有关绝对IC50的信息。

创建一张XY数据表。将激动剂浓度的对数输入X。采用任何简便单位将反应输入Y。

在数据表中，点击“分析”，选择“非线性回归”，然后选择“方程窗格”：剂量反应-特异性，X为log（浓度）。然后选择“绝对IC50，X为log（浓度）”。

您必须在“分析参数”对话框的“限制”选项卡上输入参数“基线”值。在该模型中，注意“基线”和“底部”之间的重要区别。“底部”是曲线自身底部稳定段的Y值。“基线”是定义标准药物0%最大抑制的Y值。当您 必须 在必须限制基线的同时，您还可考虑限制“顶部”参数。

五十=（顶部+基线）/2

Y=底部+（顶部-底部）/（1+10^（（LogAbsoluteIC50-X）*Hill斜率+log（（顶部-底部）/（五十-底部）-1）））

顶部和底部均为以Y轴为单位的稳定段。

Hill斜率描述了曲线族的陡度。Hill斜率1.0是标准值，您应该考虑将斜率限制为常数值1.0。大于1.0的Hill斜率更陡，而小于1.0的Hill斜率更缓。

基线 是一种引起最大抑制反应的“标准”药物或对照品的测定反应。用户必须在“分析参数”对话框的“限制”选项卡中输入该值。

LogAbsoluteIC50 是在顶部和基线之间得出一半反应的拮抗剂对数浓度。这与顶部和底部之间的一半反应不同（这是相对logIC50，本分析对其进行报告）。Prism还报告了 AbsoluteIC50。

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