【临床研究与实践】儿童血清胰岛素样生长因子Ⅰ两种检测法一致性评价

对象和方法

一、研究对象

横断面研究，以2020年2月至2021年12月就诊于首都医科大学附属北京儿童医院内分泌科的115例身材矮小症患儿为研究对象。纳入根据2005年中国九大城市儿童的体格发育统计身高数据，身高低于同年龄、同性别正常儿童生长曲线 P 3 的身材矮小症患儿，包括特纳综合征（Turner syndrome，TS）、足月小于胎龄儿（small for gestational age，SGA）等。排除标准为：（1）因营养障碍和肝肾功能异常等所致的身材矮小症患儿；（2）使用了影响血清IGF-I水平药物的患儿。对每例患儿进行详细的临床检查和个人病史记录包括身高、体重、体质指数及Tanner 分期。本研究通过首都医科大学附属北京儿童医院伦理委员会批准，［2017］-Y-017-A-02，所有患儿家长均签署知情同意书。

二、研究方法

1.IGF-1血清样本采集：晨起空腹同时留取2份血清标本待检。MS使用乙二胺四乙酸真空采血管通过静脉穿刺收集3 ml血液样本，离心后（4 ℃，2 500 g ）分离血清立即-20 ℃下储存，直到分析。CLIA采用一次性真空采血管收集3 ml血液样本并迅速离心（4 ℃，2 500 g ），血清和血浆被冷冻并在-80 ℃下储存，在首都医科大学附属北京儿童医院内分泌实验室检验待检。

2.IGF-1检测：CLIA采用德国西门子公司IMMULITE 2000 全自动免疫分析仪检测血清IGF-1水平。检测前检测仪已通过标准校准，研究中所用所有试剂（包括包被株、试剂楔、校正品、稀释液等）均为同批次。组内变异系数2.4%~6.3%，组间变异系数3.0%~7.6%。本品检验灵敏度20 μg/L，检测上限为1 600 μg/L。MS采用广州金域检验中心的美国赛默飞公司Q Exactive Focus TLX 4四极杆-轨道阱质谱仪。国际标准物为WHO 02/254 IGF-1，组内变异系数4.5%，组间变异系数5.8%，灵敏度4 μg/L，检测上限为2 000 μg/L，MS可耐受高达20 mg/L的类胰岛素样生长因子结合蛋白3干扰，不存在试剂盒治疗波动。

3.IGF-1标准差积分（standard deviation score，SDS）计算：（1）CLIA参考范围采用首都医科大学附属北京儿童医院进行的0~18岁儿童IGF-1正常值范围的研究。曲线绘制方法使用LMS（ L 为偏斜参数， M 为中位数参数， S 为变异系数）方法，用GAMLSS软件包实现构建年龄和性别特定的百分位曲线，通过Box-Cox转换和数据标准化后估计百分位数的光滑曲线。SDS=［（IGF-1/ M ） L -1］/（ L × S ）。（2）MS参考范围采用金域检验中心提供的IGF-1正常范围，数据来源于2012年美国1项纳入851例3~18岁的儿科及1 240例18~85岁的成年人的MS检测血清IGF-1正常范围的临床研究。通过建立数学模型，生成平均值和标准差的多项式方程，每个年龄的正常范围为 ± 2 s ，故SDS=（实测值- ）/ s 。IGF-1范围按照SDS分为3个级别，SDS2为高。

三、统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析。符合正态分布的计量资料用 ±s表示，采用Pearson相关分析法分析两种检测方法的相关性，并建立Deming回归方程。用散点图和Bland-Altman图分析两种方法所测得的IGF-1值和IGF SDS值的一致性。通过计算IGF-I SDS分类加权Kappa系数，分析两种检测方法一致性，以双侧P