HPLC色谱柱到底能不能反冲？

在使用HPLC柱时，经常会碰到色谱柱污染，压力升高的问题，正常的清洗有时又达不到理想的效果，这时候问题来了，HPLC柱究竟能不能反冲呢？能不能反着用呢？会不会一下给冲坏了？

HPLC色谱柱能不能反冲或者反着使用的问题，其实主要就是考虑色谱柱在反着使用的时候填料会不会容易冲塌陷，甚至是会不会被冲出来。

实际上，填料耐压能力比你想象的要好得多。在HPLC色谱柱的填充过程中，承受的压力要比其最大操作压力高得多（通常是其两倍）。所以如果使用合适的流动相并冲洗充分，填料床是可以保持稳定的，填装良好的色谱柱是能够在两个方向上运行的，不用担心填料填装松散，导致柱头塌陷的问题。

在工厂填装色谱柱时，在色谱柱两端的筛板孔径必须低于色谱柱的最小粒径。目前，色谱柱厂商常用的筛板孔径大小有0.5um和2um的，前后两端的筛板孔径大小一致。对于填料粒径5-20um的填料，一般采用的是2um的筛板，对于更小粒径的填料，所用的则是0.5um大小孔径的筛板，大家一般不用担心填料会被冲出来。

问

那为什么会有HPLC色谱柱能不能反冲这样的疑虑呢？

答

早期的色谱柱，因为有些色谱柱厂商担心用户抱怨色谱柱容易堵塞，压力升高过快，所以会把柱前端的筛板换成孔径稍大一些，导致前后筛板不一致。在这种情况下，如果色谱柱反着使用的话，是有可能会将填料冲出来的。因此，早期的色谱柱很多都建议大家不要反着使用。然后大家可能延续下来的这个习惯，对色谱柱反着使用存在疑虑。

随着大家对色谱技术深入的了解，样品预处理方法的成熟，以及色谱填装技术的更新换代，目前的色谱柱不太会存在这样的问题了，一般情况下正反两个方向都是可以使用。

一般来说，大家可以按照习惯先选择按照厂商给出的箭头流动相的方向（正向）运行，如果样品比较脏，柱子容易堵，可以隔一段时间进行反冲，等柱子正向运行效果不太好的时候，还可以反向运行试试效果如何，说不定还能多用一阵子，柱子的寿命“double”!

来源：分析与GMP返回搜狐，查看更多

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