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FlaPure Plant Total RNA Extraction Plus Kit 多糖多酚植物总 RNA 提取试剂盒(离心柱型)(RE713)

2023-03-24 15:46| 来源: 网络整理| 查看: 265

Q1:过滤柱出现堵塞? 

A1:

1) 样品用量过多。按照说明书推荐的要求适量取样; 

2) 对于富含淀粉的样品或成熟叶片,请将裂解液 GSL 用量增加至 700 μL; 

3) 离心温度过低。本产品使用操作均在室温下进行。 

Q2:提取的 RNA 出现降解? 

A2: 

1) 样品用量过多。影响裂解液的裂解能力,造成 RNase 未被充分抑制,导致 RNA 降解,建议参考 说明书推荐取样量,若要增加样品起始量,则后续实验中各溶液量均要按等比例增加。对于内源 RNase 含量较多的组织应减少样品量,适当增加裂解液用量; 

2) 样品保存不当。反复解冻会引起 RNA 降解,尽量使用新鲜样品或者解冻次数不超过 2 次的样品; 

3) 操作过程中引入 RNase 污染。请使用 RNase-Free 的工具、试剂和耗材; 

4) 电泳过程中发生降解。使用 RNase-Free 的 Loading Buffer、琼脂糖和电泳缓冲液等。 

Q3:RNA 得率低? 

A3:

1) 样品用量过多。样品过量会影响裂解效果,建议按照说明书要求适量取样; 

2) 样品裂解不充分。请按照说明书的要求进行充分研磨、裂解; 

3) 洗脱不充分。RNase-Free ddH2O 需直接加到膜中央,并静置 2 min 后再离心,必要时可进行 二次洗脱以提高产量; 

4) 吸附柱有乙醇残留。使用 Buffer GRW2 漂洗后需要开盖晾干吸附柱中的乙醇。 

Q4:提取的 RNA 中有 DNA 污染? 

A4: 

1) 样品用量过多。超出试剂盒规定的样本量影响裂解液的裂解能力可能会导致基因组的污染; 

2) 次生代谢物较多。次生代谢物含量高的样本在提取 RNA 时易出现基因组的污染; 

3) 操作过程中需要进行去除基因组 DNA 的操作,若 DNA 含量较多,可延长 DNase I 消化时间或 重复消化



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