ATAC

真核生物的DNA并不是裸漏的，而是组蛋白和染色体/染色质结合。DNA一圈一圈的缠绕在8个组蛋白上，形成核小体。一个个核小体构成串珠式的结构，然后进一步折叠、聚合，并在其他架构蛋白的协助下，形成染色体。经过一系列操作就将超长的DNA链，折叠成很小的结构，塞进小小的细胞核内。 基因的转录，需要将DNA的高级结构打开，但是不需要DNA链全部解开，只需要打开一部分，也就是基因表达的区域解开即可。这一过程，主要由染色体组蛋白的修饰（尤其是乙酰化）来实现的。这部分打开的染色质，就叫做开放染色质（染色体和染色质是同一种物质的两种形态，染色质是伸展状态，染色体是高度螺旋的状态）。而染色质一旦打开，就允许一些调控蛋白（比如转录因子）跑过来与之结合。而染色质的这种特性，就叫做染色质的可及性，所以说染色质的可及性反应的是调控因子与开放染色质结合的状态，与转录调控密切相关。 ATAC-seq是如何找开放染色质区域的呢？ 使用了转座酶Tn5：DNA转座是一种由DNA转座酶介导，把DNA序列从染色体的一个区域插入到另一个区域的现象，类似”粘贴复制“。这个过程也是需要插入位点的染色质是开放的。 既然转座酶Tn5容易结合在开放染色质上，只要人为的将NGS接头连接到转座酶，携带这些接头的转座酶进入细胞核后，切开染色质开放区域，使染色质断裂并将这些接头插入到开放的染色质区域中，这样裂解细胞、破碎DNA后，利用已知序列的测序标签进行NGS测序，就知道哪些区域是开放区域了。

可移动的DNA片段即可移动因子在基因组上自由转移称为转座，DNA与所插入的基因位点可以是非同源的。转座是产生基因多样性的重要机制，可移动因子可产生插入、缺失、倒置以及染色体融合突变。 转座需要通过转座酶来催化。原核生物的转座分为两种方式，复制转座和保守转座：

包含合成Tnp的DNA序列，两个19bp长的末端以及任意DNA序列。

Tn5转座子由两个反向的插入片段 IS50 以及两组 OE 和 IE 构成

IS（insertion sequence）： 插入序列，很小（< 2.5 kb）DNA片段，可以在不同的基因位点跳跃，或自我复制。通常存在于细菌与古细菌基因中，但也存在于真核生物的转座元素中。编码的基因一般只与移动有关。

Tn5转座对目标DNA的特异性要求不高，可以插入到任何双链DNA上。但是，Tn5也有一些偏好性，比如倾向于插入到AT富的区域，或者靠近某些特定的序列。Tn5转座酶（Tnp）的突变也可以改变其对目标DNA的结合特异性和亲和力

fastaq格式是一种基于文本的存储生物序列和对应碱基质量的文件格式。 下面为一个illumina平台测序的真实数据，其中包含了一条reads的信息