菌落总数测定实验报告（八篇）

实验八 水中菌落总数的测定及染色观察

一、实验目的

掌握国标中关于水中细菌总数的测定基本原理和方法；熟悉水体中细菌总数的检验方法、检验原理、检验依据、数据处理和报告方法。

二、实验原理

本实验应用平板计数技术测定污水中细菌总数。由于水中细菌种类繁多，它们对营养和其他生长条件的要求差别很大，不可能找到一种培养基在一种条件下，使水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以一定的培养基平板上生长出来的菌落，计算出来的水中细菌总数仅是一种近似值。目前一般是采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。

三、实验试剂与器材

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，灭菌水；

灭菌三角烧瓶，灭菌的带玻璃塞瓶，灭菌培养皿，灭菌吸管，灭菌试管，培养箱等。

四、实验步骤

(1) 水样的准备

河水，已采集。

(2) 细菌总数测定

[1]. 稀释水样取3个灭菌空试管，分别加入9ml灭菌水。取1ml水样注入第一管9 ml灭菌水内，摇匀，再自第一管取1ml至下一管灭菌水内，如此稀释到第五管，稀释度分别为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5。稀释倍数看水样污浊程度而定，以培养后平板的菌落数在30―300个之间的稀释度最为合适，若三个稀释度的菌数均多到无法计数或少到无法计数，则需继续稀释或减小稀释倍数。

[2]. 用灭菌吸管吸取1ml稀释水样，注入平板培养基的中心，并用无菌三角玻棒进行涂布。每个稀释度做三个平行，共做九个平皿。

[3]. 培养基凝固后，倒置于37℃温箱中，培养48小时，进行菌落计数。两个平板的平均菌落数即为1ml水样的细菌总数。

(3) 菌落计数方法

① 先计算相同稀释度的平均菌落数。若其中一个培养皿有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以无片状菌苔生长的培养皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到

培养皿的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全培养皿的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。

…… …… 余下全文