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Rapamycin (Sirolimus)产品说明书
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Rapamycin (Sirolimus)
目录号：S1039 批次号：S103912 打印 化学数据
别名
Rapamune, AY-22989, NSC-2260804
储存条件(自收到货起)
3年 / -20°C / 粉状
1年 / -80°C / 溶于溶剂
化学式
C51H79NO13 分子量 914.18 CAS号 53123-88-9 Solubility (25°C)* 体外 DMSO 100 mg/mL 109.38 mM Ethanol 100 mg/mL 109.38 mM Water Insoluble * 25 μM。Rapamycin(100 nM) 作用于对Rapamycin敏感的U87-MG和T98G细胞，通过抑制mTOR功能，而诱导细胞周期停在G1期，也诱导自噬而不是凋亡。[6] 体内研究在体内，Rapamycin 处理，特定阻断mTOR下游靶点，如p70S6K磷酸化和激活，和PHAS-1/4E-BP1导致的eIF4E抑制释放, 完全阻断跖肌重量和纤维尺寸的肥厚增高。[3] 短期Rapamycin处理,即使按最低剂量0.16 mg/kg处理, 强抑制p70S6K活性, 与提高的肿瘤细胞死亡和Eker肾脏肿瘤坏死相关。[4] Rapamycin作用于CT-26移植瘤模型，通过降低VEGF产量，及阻断VEGF诱导的内皮细胞信号，而抑制转移性肿瘤生长和血管新生。[5] Rapamycin每天按4 mg/kg剂量处理C6移植瘤，显著降低肿瘤生长，和肿瘤血管通透性。[7] 推荐的实验操作(此推荐来自于公开的文献所以Selleck并不保证其有效性) 激酶实验 mTOR激酶免疫印迹法测定 HEK293细胞按每孔2-2.5×105个细胞接种在12孔板上，DMEM培养基上血清饥饿处理24小时。使用浓度不断增加的Rapamycin(0.05-50 nM)在 37oC下处理细胞15分钟。加入血清，终浓度为20%，在37oC下处理30分钟。细胞溶解，使用SDS-PAGE分离细胞裂解液。再溶解的蛋白转移到聚偏(二)氟乙烯膜上，使用抗p70 S6激酶Thr-389的磷酸化的一抗进行免疫印迹。使用ImageQuant 和KaleidaGraph分析数据。 细胞实验 细胞系 U87-MG, T98G, 和 U373-MG 浓度 溶于DMSO,终浓度为~25 μM 处理时间 72 小时 方法使用不同浓度Rapamycin处理细胞72小时。为了测量细胞活力，通过胰蛋白酶化收集细胞，使用台酚蓝染色，计数每孔的存活细胞数。为了测定细胞周期, 使细胞胰蛋白酶化,与70%乙醇混合, 使用碘化丙啶染色。使用FACScan流式细胞仪和CellQuest软件分析样本DNA含量。为了测定凋亡, 细胞染色，通过末端脱氧核苷酸转移酶调节的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）技术，使用一个ApopTag凋亡检测试剂盒对细胞进行染色。为了测定酸性囊泡细胞器(AVO)的进展,使用吖啶橙(1 μg/mL)对细胞进行染色15分钟，使用荧光显微镜检测。为了量化AVOs的进展,使用吖啶橙(1 μg/mL) 对细胞进行染色15分钟, 然后使用胰蛋白酶-EDTA使其从实验板上移除，最后使用FACScan流式细胞仪和CellQuest 软件分析。为了分析自噬过程，细胞和0.05 mM丹(磺)酰戊二胺(MDC)在37oC下温育10分钟，然后在荧光显微镜下观察。 动物实验 动物模型 皮下接种表达VEGF-A的C6大鼠胶质瘤细胞的无胸腺Nu/Nu小鼠 剂量 ~4 mg/kg/day 给药处理 腹腔注射 参考文献 [1] Edwards SR, et al. J Biol Chem, 2007, 282(18), 13395-13401. [2] Barbet NC, et al. Mol Biol Cell, 1996, 7(1), 25-42. [3] Takeuchi H, et al. Cancer Res, 2005, 65(8), 3336-3346. [4] Bodine SC, et al. Nat Cell Biol, 2001, 3(11), 1014-1019. [5] Kenerson HL, et al. Cancer Res, 2002, 62(20), 5645-5650. [6] Guba M, et al. Nat Med, 2002, 8(2), 128-135. [7] Phung TL, et al. Cancer Cell, 2006, 10(2), 159-170. [8] MG Mohi, et al. Proc Natl Acad Sci U S A, 2004, 101(9), 3130–3135. [9] Rangaraju S, et al. J Neurosci. 2010 Aug 25;30(34):11388-97. 客户使用selleck产品的实验数据
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数据来源于[Data independently produced by Cell Rep, 2015, 10.1016/j.celrep.2015.01.014] 
数据来源于[Data independently produced by Biochem Pharmacol, 2015, 95(3), 156-69] 
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