德国Minerva Biolabs支原体qPCR检测试剂盒操作步骤

德国Minerva Biolabs公司，通称德国MB公司，Minerva Biolabs GmbH 公司是世界上较为出名的微生物污染控制公司，尤其是支原体和军团菌的技术和产品，在全球科研行业上很受欢迎。有很多做细胞培养的同学都对德国MB公司的支原体污染检测试剂盒感兴趣，今天缔一生物小编就跟大家分享一下MB支原体qPCR检测试剂盒的操作步骤。

德国Minerva Biolabs支原体qPCR检测试剂盒操作步骤

第1步：样本处理

a.细胞培养上清

b. 生物药或需遵循药典的样本

说明：

①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

②细胞培养物样本含丰富的DNA酶，在低温下也能降解支原DNA，影响检测灵敏度。

建议：样本做DNA抽提处理，实现最高灵敏度。

推荐：德国MB公司生产的专用支原体DNA提取试剂盒

Venor® Gem Sample Preparation Kit

该DNA抽提试剂盒已经过广泛验证。

第2步：试剂制备

a.冻干粉溶解

b. 反应体系制备

b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备

b2) 样品为生物药——反应体系制备

第3步：启动荧光定量PCR仪

第4步：结果判别

FAM通道：检测支原体荧光信号。HEX通道：检测内控对照荧光信号。

支原体DNA和内控DNA存在信号的竞争性抑制。

支原体DNA越多，FAM通道信号越高，检测内控对照的HEX通道信号越低。

定量需基于Ct值和DNA标准曲线。

Ct＜40为阳性结果。Ct≥40为阴性结果。

更多德国Minerva Biolabs支原体qPCR检测试剂盒操作步骤及介绍，请点击查看详情：支原体qPCR Kit（经典法）检测试剂盒-支原体荧光定量PCR检测试剂盒 - 缔一生物 (dyshengwu.com)