阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量测定

林炜杰通讯作者 浙江大学医学院附属第一医院  浙江杭州  310006            【摘  要】目的：采用高效液相色谱法（HPLC法）测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量。方法：色谱柱为 Hypersil ODS2（5um，250mm×4.6mm），流动相为甲醇∶0.5％乙酸溶液（37∶63），检测波长为276nm，流速0.8ml/min，柱温25℃，进样量10μL。结果：三批次阿司匹林肠溶片供试品的含量分别为标示量的 99.2%、101.8%、99.0%；阿司匹林在 20μg /ml~150μg /ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系，平均加样回收率为 102.7%，RSD=0.96%。结论：采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，操作简单，重复性好，回收率高，准确度良好，可用于阿司匹林肠溶片的质量控制。            【关键词】阿司匹林肠溶片；高效液相色谱法；含量测定

           阿司匹林是水杨酸类解热镇痛药物，临床上主要用于治疗感冒发烧，牙痛、肌肉痛及神经痛等慢性疼痛，急、慢性风湿病及类风湿病等，是风湿、类风湿关节炎治疗的常用药物。现在的研究发现小剂量的阿司匹林也可用于预防恶性肿瘤，对多种疾病有治疗作用。阿司匹林含量的测定方法很多，有容量分析法、紫外分光光度法、HPLC法、薄层色谱法、气相色谱法等。笔者采用高效液相色谱法（HPLC法）测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，操作简单，快速方便，回收率高，可用于阿司匹林肠溶片的质量控制。            1 仪器与试药            1.1 仪器：依利特 P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号 KQ5200E，功率 200W，频率 40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。            1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：170316）；阿司匹林肠溶片（A公司，批号：170512；B公司，批号：170705；C公司，批号：170603），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。            2 方法与结果            2.1 色谱条件：色谱柱为 Hypersil ODS2 柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇∶0.5%乙酸溶液（37∶63），流速0.8ml/min，柱温25℃，检测波长267nm。理论板数按阿司匹林计不得少于3000。            2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置 100ml 量瓶中，加 1%醋酸甲醇溶解并定容制成100μg/ml的对照品溶液。 供试品溶液的制备：取供试品（B公司，批号：170705）约 0.03g，精密称定，置 100ml 量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。 阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。            2.3 专属性实验：在“2.1”色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各 10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果显示阿司匹林与其他组分色谱峰可完全分离，且阴性样品无干扰。            2.4 线性范围：精密吸取对照品溶液（100μg/ml）2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml，分别置于 10ml 量瓶中，用 1%醋酸甲醇稀释至刻度，摇匀。浓度分别为 20、40、60、80、100、120 和 150μg/ml，在上述色谱条件下分别进样 10μL，测定峰面积 A 积分值，以浓度（Cμg/ml）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：A=5.0611C－11.278，r2=0.9991。试验结果表明：阿司匹林在20μg/ml～150μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。            2.5 精密度试验：分别精密吸取对照品溶液（100μg/ml）和供试品溶液（B公司，批号：170705）各 10μL，连续进样 6 次，分别测定其峰面积 A，结果对照品溶液 RSD 为1.3%，供试品溶液 RSD 为 1.4%。结果表明：该方法精密度良好，符合含量测定要求。            2.6 稳定性试验：取供试品溶液（B公司，批号：170705），分别于 0、2、4、6、8、10h 进样，进样量为 10μL，测定峰面积，RSD 为 1.1%。结果表明：供试品溶液在 10h 内稳定性良好，符合含量测定要求。            2.7 重复性试验：取供试品（B公司，批号：170705）约 0.03g，精密称定，共 6 份，分别按供试品溶液制备方法制备，并测定含量，平均含量，RSD 为 1.1%。结果表明：该方法的重复性好，符合含量测定要求。            2.8 加样回收试验：取已知含量的供试品（B公司，批号：170705）6 份，每份约 0.015g，精密称定，置量瓶中，分别精密加入阿司匹林对照品 3.6、4.5、5.4mg 各两份，按上述供试品溶液制备方法制备，分别测定，计算回收率。结果平均加样回收率为 102.7%，RSD 为 0.96%。结果表明：该方法的准确度良好，符合含量测定要求，见表1。

              3 讨论            阿司匹林为酸性非甾体药物，具有解热、镇痛、消炎的特性。通常口服0.3-1g阿司匹林用于缓解疼痛和低热，如感冒和流感，可降低体温和解除关节肌肉疼痛。阿司匹林也可应用于慢性、急性炎症如风湿性关节炎、骨关节炎、僵直性脊椎炎。阿司匹林抑制血小板血栓素A2的生成，从而抑制血小板聚集，其机理为不可逆的抑制环氧合酶的合成；由于血小板内这些酶不可再合成，所以此抑制作用尤为显著。阿司匹林对血小板还有其他抑制作用，因此可广泛应用于心血管疾病。 《中国药典》收载的品种有阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、阿司匹林肠溶胶囊、阿司匹林泡腾片和阿司匹林栓，以及国家食品药品地标收载的小剂量的阿司匹林肠溶片，这些药品成分相同，作用类似，在临床上得到了广泛的应用。            阿司匹林肠溶片的主要成份是阿司匹林，两者的区别在于，阿司匹林肠溶片的效力持续时间长。阿司匹林肠溶片剂吸收慢，能够降低血小板的效力——血小板可导致血液凝结。由于这种功效，心脏病和中风患者服用阿司匹林，可降低出现血凝块的可能性。科学家认为血小板同样与恶性肿瘤的形成有关，同时能够将这种疾病扩散到身体其他部位。通过降低血小板效力，阿司匹林肠溶片能够帮助预防和治疗癌症。 随着科学技术的进步，各种仪器设备、新方法的应用，形成了阿司匹林鉴别和含量测定方法的各异性。本研究采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，平均加样回收率为 102.7％，RSD=0.96％，操作简单，快速方便，重复性好，回收率高，可用于阿司匹林肠溶片的质量控制。            参考文献：            [1]中华人民共和国药典 二部 2010版            [2]徐新，廖思嘉，廖先智，等，高效液相色谱法测定阿司匹林含量[J].广州化工，2012，40（8）            [3]李飞玲.HPLC 与 UV 法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林及水杨酸含量[J].长治医学院学报，2011，25（1）