ELISA夹心法和竞争法在Excel中拟和曲线

一、双抗夹心法拟和曲线

打开EXCEL软件；在工作表中输入第一行： 浓度值， 如0 10 50 100 400

输入第二行：该浓度下的调整後的od值，如0 0.586 1.397 1.997 3.42

选择这些输入的数据，用插入里的图表按钮，进入图表向导，在“标准类型”中选择“xy散点图”；在“子图表类型”中选择“折线散点图”，按“下一步”；选择“系列产生在行”，按“下一步”；数据标志，可以填写：如数据y轴，OD值；数据x轴，浓度；按下一步，点击完成。可得曲线图。

单击曲线，按右键，选择“添加趋势线”，在类型中，选择多项式；在选项中，选择显示公式，选择显示R平方值。得到公式和R平方值。

也可以用上面说的方法，在公司已经提供的图表上， 双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和新的曲线。

二、计算浓度

举例

第一次实验：

标准曲线为：

y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1

R2 = 0.9745 为例，已知OD值，计算浓度。

由于y = -4E-05x2 + 0.026x+0.1，所以可以得到：

4E-05x2 －0.026x ＋(y-0.1)＝0

ax2 ＋bx ＋C＝0

a＝4E-05；b＝ －0.026； C= y-0.1

x＝（－b－（b*b－4a(y-0.1)）（平方根）） /(2*a)

代入a，b，和y值，得

x＝（0.026－（0.026*0.026-0.00016*(y-0.1)）(平方根）)/(2*0.00004）

在excel里可以用以下公式表示：

x＝(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*(y-0.1))/2))/(2*0.00004)

通用公式为： Y=ax2 ＋bx ＋C

x＝（－b－EXP(LN（b*b－4a(y-c)）/2)）/(2*a)

您可以应用excel的公式拷贝功能，计算所有浓度。

简化方法 如果有示例的excel表格，过程可参照附件的EXCEL表格，您的新数据可以这样拟和：双击图表，把它输入到图表的数据中，就可以拟和曲线。

根据曲线方程序，更改公式的参数，计算出浓度。

三、竞争法拟和曲线

Logit-log 直线回归

竞争法一般情况下用Logit-log 直线回归的方法可以拟和成近似一条直线；

令 p = OD/OD0, q = 1 - p,

y = ln (p / q), x = lg (浓度),

其中: OD 为反应值,

OD0 为浓度为 0 的反应值的均值,

则方程为:

y = a + b*x