应用

该图为验证蛋白EDR1与蛋白EDR4之间是否存在相互作用的结果图。由图可以得到的信息如下：

◆ 蛋白EDR4带有GFP标签，蛋白EDR1带有FLAG标签，该实验为利用蛋白标签来沉淀和检测蛋白；

◆ 该CO-IP实验被分为两组

第一组：同时存在GFP空标签蛋白+EDR1-FLAG蛋白；

第二组：同时存在EDR4-GFP蛋白+EDR1-FLAG蛋白；

同时图中共有三组胶图，分别是Input组，IP组，以及CO-IP组。

结论解读

观察图片的顺序与Co-IP实验操作顺序相同。

1. Input组

Input组：即阳性对照组，WB证明目的蛋白在蛋白样本中是客观存在的，可以用于后续IP实验。

第一块胶图：利用anti-FLAG沉淀FLAG标签，发现两个条带都在130kd处有蛋白，说明两组实验都存在EDR1-FLAG蛋白且其大小为130kd；

第二块胶图：利用anti-GFP标签沉淀GFP标签，发现第一条带在25kd存在蛋白，而第二条带在130kd存在蛋白，说明第一组实验存在GFP标签，且大小为25kd，第二组实验存在EDR4-GFP蛋白且大小为130kd。

2. IP组

IP组：用于证明IP能正常沉淀目的蛋白是有效的。

该组图表示的是利用anti-FLAG对EDR1-FLAG蛋白进行沉淀，图上显示两组实验在130kd都存在蛋白，说明两组实验的EDR1-FLAG被沉淀下来。

3. CO-IP组

CO-IP组：用来证明研究的2个蛋白是否存在互作。

该组图表示在IP组的基础上进一步利用anti-GFP检测GFP标签，图上显示第一组实验没有条带，而第二组实验在130kd处有蛋白。说明IP组没有把GFP标签共沉淀下来，但是把EDR4-GFP蛋白共沉淀下来了，说明EDR1-FLAG蛋白不能与GFP标签相互作用，但是可以与EDR4-GFP蛋白相互作用。

结论：EDR1蛋白可以与EDR4蛋白存在相互作用。

文献图解二

该图为验证蛋白ChREBP与蛋白HDAC1之间是否存在互作的结果图，由图可以得到的信息如下：

◆ 蛋白ChREBP带有FLAG标签，蛋白HDAC1带有Myc标签。

◆ 该实验是利用标签抗体Flag来沉淀及检测带有Flag标签的ChREBP蛋白，用Myc标签WB检测HDAC1蛋白。

◆ 该实验共有三组：

第一组：加Myc-HDAC1不加FLAG-ChREBP；

第二组：加FLAG-ChREBP不加Myc-HDAC1；

第三组：FLAG-ChREBP与Myc-HDAC1两个都加。

实验共有四张胶图，分别为IB：Myc、IB：FLAG（这两张胶图为阳性对照），IP：FLAG IB：FLAG（IP组），IP：FLAG IB：Myc（Co-IP组）。

结论解读

1. Input组

Input组：最下面的IB：Myc与IB：Flag两张图片，两个胶图为利用WB验证Myc-HDAC1及FLAG-ChREBP存在的阳性对照 。

2. IP组

IP组：用于证明IP能正常沉淀目的蛋白是有效的。第二张胶图（IP：Flag，IB：Flag），表示的实验操作是利用anti-FLAG沉淀FLAG-ChREBP蛋白，图上显示经IB验证第二、第三组FLAG-ChREBP蛋白被成功沉淀下来，而第一组没有结果（第一组不存在FLAG-ChREBP蛋白），证明IP实验。

3. Co-IP组

Co-IP组：用来证明研究的2个蛋白是否存在互作。第一张胶图表示在anti-FLAG沉淀FLAG-ChREBP蛋白的基础上进行IB检测验证Myc-HDAC1蛋白是否存在。图上显示第一、第二组实验没有检测到（第一组不存在FLAG-ChREBP蛋白，第二组不存在Myc-HDAC1蛋白），但是第三组实验检测到了Myc-HDAC1蛋白。由此可以得到结论：两个蛋白都存在的时候，当FLAG-ChREBP蛋白被沉淀，Myc-HDAC1蛋白也会被共沉淀下来。

结论：ChREBP蛋白与HDAC1蛋白之间存在相互作用。

扫码了解更多详情

上海七纯生物科技有限公司