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单细胞数据分析入门教程汇总

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最近发现公众号不少看官是单细胞测序领域新手,来咨询有没有「系统」学习单细胞数据分析的教程。我的回答是,我暂时没看到全网真正系统、全面的教程;但是好的教程确实有不少。

我的入门资源是一个非常棒的老教程:https://hemberg-lab.github.io/scRNA.seq.course。这是剑桥大学一门生信training课程的配套资料; 也感谢公众号读者推荐了另一个资源:https://nbisweden.github.io/workshop-scRNAseq/

比如国内头部生信公众号生信技能树、生信菜鸟团估计有最全的数据分析教程,涉及到各种零星的方面。当然,我这篇推文主要想总结一下目前市面上「单细胞数据分析的视频教程资源」

❝ 首先首先,我要说明的建议是:入门看教程,入了门就一定要「看官方文档」「看英文文献」「看源码」!只有养成看官方文档/文献、阅读源码的探索学习能力,才能早日从无穷无尽的教程里走出来。 ❞单细胞分析有哪些方面?

关于单细胞分析流程的概览,我个人非常喜欢 Fabian Theis(scanpy 通讯作者,scanpy 与 seurat 在单细胞分析领域齐名) 2019 年在 Molecular systems biology 发表的一篇综述文章:"Current best practices in single‐cell RNA‐seq analysis: a tutorial",非常全面的总结了单细胞全流程分析的十大方面,包括:

Pre-processing(10x: cellranger)Quality control (filter/doublets)NormalizationData correction and integrationFeature selectiondimensionality reduction and visualizationCluster analysis & AnnotationCompositional analysisTrajectory analysisGene-level analysis (DEGs, Enrichment, GRN)

感兴趣的也可以参考我的 B 站视频:https://www.bilibili.com/video/BV1m34y1i7Vf

双细胞处理

双细胞分析算是单细胞测序分析的标准流程了现在,根据使用经验和 Xi et al, Cell Reports, 2021 的综合比较,推荐使用 DoubletFinder 和 DoubletDetection。双细胞检测工具在不同数据集上适用不同算法,我个人使用主要根据对数据的理解来选择最优的工具。

单细胞标准流程教程

这方面的教程非常多,主要包括十大方面的前七个方面,从数据下机处理到分群注释,我整理了以下不错的教程:

R 语言 Seurat 流程:

我的 B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1AL411w7sHTop 菌 B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1JQ4y1X7yKBiomamba B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1S44y1b76Z, 播放量过 4 万!

python scanpy 流程:

我的 B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1sq4y1C7Qx

单细胞绘图教程:

Top 菌 B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1Mr4y1k7Vm,基于R Seurat 绘图,这个播放量过万!我的 B 站视频教程: https://www.bilibili.com/video/BV1Lq4y1h7xr,基于python scanpy 绘图单细胞整合分析

这方面暂时没关注到非常全面的视频解析教程,已经有两篇 benchmarking 文章全面比较了多样本整合分析算法性能。分别是 Tran et al, Genome biology, 2020 和 luecken et al, nature methods, 2022。

后面scvi系列很多深度学习系列的整合分析工具出来了,但是我没有用过。个人经验发现,Seurat整合容易过拟合,一般harmony整合通过细致调参可以拿到非常好的结果。

单细胞细胞比例分析教程

细胞比例分析是单细胞分析中很重要的一个基础分析,目前暂时没看到很系统的教程,有时间小编可以整理一下。但是,很多值得学习的文献,我贴在下面供大家学习。

案例 1,张泽民老师 2018 年 nature medicine, Fig.1d

案例 2,Jonas Schulte-Schrepping et al, Cell, 2020. Fig.1d & Fig.2E

案例 3,Aaron J. Wilk et al, nature medicine, 2020, Fig.1d

单细胞假时间分析Biomamba B 站视频教程:https://www.bilibili.com/video/BV1br4y1x7Hf, 包括 monocle2, monocle3

当然,假时间分析有一篇非常经典的 benchmarking 文章,比较了 45 种假时间算法的性能,大家可以参考选择。我个人常用的假时间分析工具还包括几个基于 python 的算法:PAGA, Palantir(2019, nature biotechnology), scvelo(2020, nature biotechnology)

Gene-level analysis

这方面包括 DEGs, Enrichment, GRN。

Enrichment 分析大家应该主要用在线工具 metascape(Metascapehttps://metascape.org), Enrichr(https://maayanlab.cloud/Enrichr/),Y 叔的 R 包 clusterProfiler(https://bioconductor.org/packages/release/bioc/html/clusterProfiler.html)。徐洲更 B 站视频教程:https://www.bilibili.com/video/BV1wb411i7ig GRN (基因调控网络)分析主要是 SCENIC(https://github.com/aertslab/SCENIC)。当然这两个分析本身在 scRNA-seq 上做只是一些辅助性的功能。欧易 B 站视频:https://www.bilibili.com/video/BV1bQ4y1D7fY 单细胞 TCR BCR 数据分析我的 B 站视频:https://www.bilibili.com/video/BV1w94y1R7pw单细胞细胞通讯分析Biomamba B 站视频教程:https://www.bilibili.com/video/BV1Ab4y1W7qx空间转录组数据分析

空间转录组数据分析我目前已经推出了五期视频教程:

第五期,Seurat 单细胞空间转录组数据分析教程,视频地址:https://www.bilibili.com/video/BV1Tv4y1w7QN 第四期,Squidpy | 空间转录组(ST)之图像分析实用教程,视频地址:https://www.bilibili.com/video/BV1RS4y1h7Ed 第三期,Tangram | 空间转录组(ST)和单细胞转录组(scRNA-seq)数据整合分析教程,视频地址:https://www.bilibili.com/video/BV1a44y1A7SQ 第二期,空间转录组(spatial transcriptome)数据分析基础教程,视频地址:https://www.bilibili.com/video/BV1Ar4y167Km 第一期 ,2022 最新空间转录组(spatial transcriptome)数据分析指南,视频地址:https://www.bilibili.com/video/BV1Lq4y1h7xr

其他优质视频教程:

有编制的弼马温 B 站视频教程:https://www.bilibili.com/video/BV1vK4y1P7UP❝ 最后最后,我想说希望大家都早日进阶,早日发大文章! ❞


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