pRNA

2023-04-19 02:28| 来源: 网络整理| 查看: 265

pRNA-SP6-T7是碧云天研发的一种用于体外基于SP6或T7启动子(SP6 or T7 Promoter)进行RNA转录的空质粒。在该质粒中的多克隆位点插入目的基因并线性化后，就可以作为RNA体外转录的模板。体外转录的RNA可以用于mRNA疫苗、体外蛋白翻译、转染细胞用于目的基因的表达、体外研究翻译调控机制、体外研究RNA降解机制、蛋白与RNA的相互作用等。

pRNA-SP6-T7的多克隆位点两侧分别含有SP6和T7启动子，在多克隆位点插入目的基因后，可以分别使用SP6或T7 RNA聚合酶进行RNA的体外转录。根据RNA转录的方向和插入的目的基因的方向，可以得到目的基因的正义或反义的RNA。

本质粒为氨苄青霉素抗性。

pRNA-SP6-T7质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide Position M13 forward primer binding site 379-395 SP6 promoter 405-423 Multiple cloning site 424-483 T7 promoter 484-502 M13 reverse primer binding site 518-534 lac operator 542-558 lac promoter 566-596 ori 920-1508 Ampicillin resistance ORF 1679-2539 Ampicillin promoter 2540-2644

pRNA-SP6-T7质粒(2739bp)的图谱如下：

pRNA-SP6-T7的多克隆位点的详细图谱见说明书：https://www.beyotime.com/Manual/D2314 pRNA-SP6-T7 (RNA体外转录质粒).pdf。

pRNA-SP6-T7中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pRNA-SP6-T7 once)包括：

Acc65I BbvCI BsmFI BtgZI NaeI PpuMI SgrAI AfeI BclI BsmI ClaI NgoMIV PshAI SnaBI AflII BfuAI BspDI CspCI NheI PsiI SphI AgeI BlpI BspEI DraIII NotI PspOMI SrfI AleI BmgBI BspMI EagI NruI PspXI StuI ApaI BmtI BsrGI Eco53kI NsiI PstI SwaI AscI Bpu10I BssHII EcoNI PacI RsrII Tth111I AsiSI BsaAI BstBI FseI PaqCI SacI XcmI AvrII BsaBI BstEII HpaI PflFI SacII BaeI BseRI BstXI KpnI PflMI SbfI BanII BsgI BstZ17I MfeI PmeI SexAI BbsI BsiWI Bsu36I MscI PmlI SfiI

pRNA-SP6-T7中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pRNA-SP6-T7 once)包括：

AatII G,ACGT`C 2670 NarI GG`CG,CC 236 AccI GT`MK,AC 449 NcoI C`CATG,G 442 AhdI GACNN,N`NNGTC 1751 NdeI CA`TA,TG 184 AlwNI CAG,NNN`CTG 1272 NmeAIII GCCGAG(N)19,NN` 1899 ApoI R`AATT,Y 503 PaeR7I C`TCGA,G 424 BamHI G`GATC,C 472 PciI A`CATG,T 859 BcgI ,NN` (N)10CGA(N)6TGC(N)10,NN` 2255 PluTI G,GCGC`C 235 BglII A`GATC,T 430 SalI G`TCGA,C 448 BpmI CTGGAG(N)14,NN` 1820 SapI GCTCTTCN`NNN, 743 BsaI GGTCTCN`NNNN, 1813 ScaI AGT|ACT 2232 BsaXI ,NNN` (N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` 704 SfoI GGC|GCC 237 BseYI C`CCAG,C 1163 SmaI CCC|GGG 438 BspQI GCTCTTCN`NNN, 743 SpeI A`CTAG,T 460 BsrFI R`CCGG,Y 1832 SspI AAT|ATT 2556 BstAPI GCAN,NNN`NTGC 182 StyI C`CWWG,G 442 BtgI C`CRYG,G 442 TspMI C`CCGG,G 436 EcoO109I RG`GNC,CY 2728 XbaI T`CTAG,A 466 EcoRI G`AATT,C 503 XhoI C`TCGA,G 424 EcoRV GAT|ATC 480 XmaI C`CCGG,G 436 HincII GTY|RAC 450 XmnI GAANN|NNTTC 2351 HindIII A`AGCT,T 399 ZraI GAC|GTC 2672 KasI G`GCGC,C 235 MluI A`CGCG,T 454

pRNA-SP6-T7质粒中推荐使用的测序引物序列如下：

M13 forward primer (379-395): 5´-GTAAAACGACGGCCAGT-3´

M13 reverse primer (518-534): 5´-CAGGAAACAGCTATGAC-3´

pRNA-SP6-T7的全序列信息：D2314 pRNA-SP6-T7(RNA体外转录质粒)全序列 .txt

包装清单：产品编号产品名称包装 D2314-1µg pRNA-SP6-T7(RNA体外转录质粒) 1μg D2314-100µg pRNA-SP6-T7(RNA体外转录质粒) 100μg — 说明书 1份保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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