基因敲除方法和原理合集

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基因敲除的原理

基因敲除技术是今天遗传学和分子生物学研究中使用最频繁的

方法之一。

它由美国遗传学家

ManiSatija

和

SandervandenHeuvel

于

1994

年提出，

属于一种基因沉默技术，

也可称为

“基因编辑”

技术。

它旨在修改和靶向特定基因的活动，

以调节和反映生物体的生物功能。

基因敲除技术最初是以生物学实验室环境，

利用基因工程技术或

染色质学实验等原理，

分别针对某个特定基因，

以编码特定基因产物

的

DNA

序列进行操作，

以阻断其在特定基因表达，

以解析基因作用机

制。此外，可以将基因敲除技术应用于海洋生物、植物、微生物、酿

酒酵母、昆虫、动物和其他细胞等领域，共同探索基因的功能。

基因敲除技术可以产生细节复杂的子代动物样品，

可以比较研究

目标基因突变与正常基因之间的不同表达。

基因敲除技术可以用于研

究多种基因之间的协同作用，

研究其生物学功能及其演化变异，

并分

析它们是如何引起特定的疾病。

基因敲除的主要原理是：

采用特定酶切除某一特定基因或基因序

列，以彻底抑制其表达，采用不同的技术手段针对不同的基因研究。

常见的基因敲除方法有

RNA

干扰（

RNAi

）

、基因突变技术、亚单位抑

制和基因融合等。

首先介绍

RNAi

技术，它是一种通过抑制

RNA

介导蛋白质表达来

抑制特定基因表达的方法。

RNA

干扰技术可以有效地抑制已知基因的

表达或阻挡未知基因的表达，

它的原理是将小

RNA

片段与表达特定基

因的

mRNA

形成靶向结合，

使其被降解，

从而抑制

RNA

的表达。

此外，