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Aureobasidin A(AbA/金担子素 1 mg/mL)

2024-05-25 22:31| 来源: 网络整理| 查看: 265

产品规格

货号 规格 目录价 YC8052S 1 ml 580 YC8052M 5×1 ml 待定 产品内容

包装名称 包装含量 保存条件 保存时间 Aureobasidin A(AbA/金担子素 1 mg/mL) 1 ml/支 -20℃ 24个月

产品组分与配方

产品组分 分子式/CAS号/分子量 配方ml/L 除菌方式 Aureobasidin A/金担子素/金担子素A

C60H92N8O11/127785-64-2/1101.13

1mg/ml 0.22um过滤

100%乙醇(Absolute ethanol)溶解

------ ------ ------

使用方法

1.Y2HGold(pGBKT7+pGADT7)双杂系统:Y2HGold菌株基因组中整合了AbA抗性基因AUR1-C,Y2HGold有四个报告基因:AbAr,HIS3,ADE2,MEL1,当蛋白互作时会激活这四个报告基因的表达。酵母双杂的自激活验证和筛选试验中AbA的常规使用浓度为125-200ng/ml。在做酵母双杂试验之前应对Bait质粒进行自激活验证,初始AbA浓度可以用125ng/ml,若没有自激活,可将此浓度作为后面双杂试验时的筛选浓度,若有自激活可以提高AbA浓度,直到Bait质粒没有自激活为止,但AbA浓度最高不要超过1000ng/ml(若超过此浓度仍然有自激活,说明酵母细胞中有内源转录因子或其他分子可以识别Bait质粒,激活AUR1-C基因,这种试验结果是不准确的)。若酵母筛库试验中获得的阳性菌落太少,可以适当降低筛库时的AbA浓度到100ng/ml。

2.Y1HGold(pAbAi+pGADT7)单杂交系统:Y1HGold菌株基因组本身没有整合AbA抗性基因AUR1-C,在pBait-AbAi 经线性化整合到Y1HGold基因组后变成Y1HGold[Bait/AbAi] 菌株,此菌株含有报告基因:AbAr,当蛋白与DNA互作时会激活AUR1-C(AbAr)基因的表达。酵母单杂的自激活验证和筛选试验中AbA的常规使用浓度为100- 200ng/ml。在做单杂试验之前应对Bait质粒进行自激活验证,初始AbA浓度可以设置为:100ng/ml、150ng/ml、200ng/ml,若均没有自激活,可选最低浓度作为后面单杂试验时的筛选浓度,若有自激活可以提高AbA浓度,直到Bait质粒没有自激活为止,但AbA浓度最高不要超过1000ng/ml(若超过此浓度仍然有自激活,说明酵母细胞中有内源转录因子或其他分子可以识别报告基因,激活AUR1-C基因,这种试验结果是不准确的)。单杂的自激活验证可先将菌液浓度调整到OD600=0.2, 再稀释100倍到 0.002,取 100ul涂相应AbA浓度平板即可

3. 倒平板:酵母用固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下,

若配制125ng/ml的AbA平板,每100ml培养基加入12.5ul 1mg/ml的 Aureobasidin A溶液混匀倒平板即可;

若配制200ng/ml的AbA平板,每100ml培养基加入20ul 1mg/ml的 Aureobasidin A溶液混匀倒平板即可。

● 产品参数:

CAS:127785-64-2

英文名称:Aureobasidin A

分子量:1101.13

分子式:C60H92N8O11

纯度:≥98.0%

固体外观:白色粉末

溶解性:易溶于乙醇

注意事项

1.不开封的 Aureobasidin A 溶液(过滤除菌)可在-20℃保存两年,开封后若发现染菌,停止使用。

● 文献

1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.

2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet. 251(2):236–244.

产品规格

货号 规格 目录价 YC8052S 1 ml 580 YC8052M 5×1 ml 待定 产品内容

包装名称 包装含量 保存条件 保存时间 Aureobasidin A(AbA/金担子素 1 mg/mL) 1 ml/支 -20℃ 24个月

产品组分与配方

产品组分 分子式/CAS号/分子量 配方ml/L 除菌方式 Aureobasidin A/金担子素/金担子素A

C60H92N8O11/127785-64-2/1101.13

1mg/ml 0.22um过滤

100%乙醇(Absolute ethanol)溶解

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使用方法

1.Y2HGold(pGBKT7+pGADT7)双杂系统:Y2HGold菌株基因组中整合了AbA抗性基因AUR1-C,Y2HGold有四个报告基因:AbAr,HIS3,ADE2,MEL1,当蛋白互作时会激活这四个报告基因的表达。酵母双杂的自激活验证和筛选试验中AbA的常规使用浓度为125-200ng/ml。在做酵母双杂试验之前应对Bait质粒进行自激活验证,初始AbA浓度可以用125ng/ml,若没有自激活,可将此浓度作为后面双杂试验时的筛选浓度,若有自激活可以提高AbA浓度,直到Bait质粒没有自激活为止,但AbA浓度最高不要超过1000ng/ml(若超过此浓度仍然有自激活,说明酵母细胞中有内源转录因子或其他分子可以识别Bait质粒,激活AUR1-C基因,这种试验结果是不准确的)。若酵母筛库试验中获得的阳性菌落太少,可以适当降低筛库时的AbA浓度到100ng/ml。

2.Y1HGold(pAbAi+pGADT7)单杂交系统:Y1HGold菌株基因组本身没有整合AbA抗性基因AUR1-C,在pBait-AbAi 经线性化整合到Y1HGold基因组后变成Y1HGold[Bait/AbAi] 菌株,此菌株含有报告基因:AbAr,当蛋白与DNA互作时会激活AUR1-C(AbAr)基因的表达。酵母单杂的自激活验证和筛选试验中AbA的常规使用浓度为100- 200ng/ml。在做单杂试验之前应对Bait质粒进行自激活验证,初始AbA浓度可以设置为:100ng/ml、150ng/ml、200ng/ml,若均没有自激活,可选最低浓度作为后面单杂试验时的筛选浓度,若有自激活可以提高AbA浓度,直到Bait质粒没有自激活为止,但AbA浓度最高不要超过1000ng/ml(若超过此浓度仍然有自激活,说明酵母细胞中有内源转录因子或其他分子可以识别报告基因,激活AUR1-C基因,这种试验结果是不准确的)。单杂的自激活验证可先将菌液浓度调整到OD600=0.2, 再稀释100倍到 0.002,取 100ul涂相应AbA浓度平板即可

3. 倒平板:酵母用固体培养基微波炉加热融化后或高压灭菌后冷却至55℃以下,

若配制125ng/ml的AbA平板,每100ml培养基加入12.5ul 1mg/ml的 Aureobasidin A溶液混匀倒平板即可;

若配制200ng/ml的AbA平板,每100ml培养基加入20ul 1mg/ml的 Aureobasidin A溶液混匀倒平板即可。

● 产品参数:

CAS:127785-64-2

英文名称:Aureobasidin A

分子量:1101.13

分子式:C60H92N8O11

纯度:≥98.0%

固体外观:白色粉末

溶解性:易溶于乙醇

注意事项

1.不开封的 Aureobasidin A 溶液(过滤除菌)可在-20℃保存两年,开封后若发现染菌,停止使用。

● 文献

1. Takesako, K. et al. (1993) J. Antibiot. (Tokyo) 46(9):1414–20.

2. Hashida-Okado, T. et al. (1996) Mol. Gen. Genet. 251(2):236–244.



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