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ADCP Reporter Bioassay

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抗体依赖的细胞介导的细胞吞噬作用(Antibody-dependent cell-mediated phagocytosis, ADCP)是治疗性抗体对抗病毒感染或者肿瘤疾病的一种重要作用机制。在体内,ADCP作用由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞以及树突细胞通过其细胞表面表达的FcγRIIa、FcγRI、FcγRIIIa介导,其中FcγRIIa被认为是ADCP作用过程中最主要的Fcγ受体。ADCP作用过程为抗体与疾病细胞表面的抗原特异性结合,随后抗体Fc片段与效应细胞(如巨噬细胞)表面Fcγ受体结合,诱导巨噬细胞吞噬疾病细胞。

传统ADCP检测方法非常复杂,需要从外周血中分离单核细胞,并经过多日培养分化得到巨噬细胞以作为效应细胞。检测时需要对效应细胞及靶细胞进行免疫标记,通过流式细胞仪等手段探测效应细胞对靶细胞的吞噬作用。该方法变异性大、耗费人力、耗时长,不适合作为质量控制的方法。因此需要有一种简便快捷并且可通过方法学验证的ADCP检测方法用以分析治疗性抗体的Fc功能。

Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay是一种生物发光报告基因检测方法,用于检测抗体的ADCP生物学活性。其检测原理基于体内ADCP作用机理,为通过NFAT(Nuclear factor of activated T-cells)信号通路激活基因转录(图1)。本系统采用基因工程改造的Jurkat细胞作为效应细胞,该细胞稳定表达FcγRIIa受体(H131高亲和力突变体)和由NFAT应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶。抗体在识别靶细胞后,通过与效应细胞表面FcγRIIa的结合,激发细胞内NFAT反应元件,NFAT反应元件则驱动的萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶活性通过生物发光进行定量。

图1. Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay原理图

包装规格:

组分

规格

货号

     FcγRIIa-H ADCP Bioassay效应细胞(5×106cells/ml)

1×1ml

RA-CK09

特点:

Rhinogen® ADCP报告基因检测系统提供的ADCP生物学活性检测方法操作具有操作简便(图2)、变异性低、灵敏度高等特点,并可与多种不同的靶细胞搭配使用。

ü 原理明确:基于抗体结合细胞对效应细胞FcγRIIa受体信号通路的激活

ü 应用广泛:治疗性抗体药物的Fc功能学研究及质控、ADCP作用机制研究

ü 操作简便:检测过程简单,检测试剂易用

ü 适用性广:该系统已完成对悬浮或贴壁的多种靶细胞的适用性验证,效果良好

Rhinogen® ADCP报告基因检测系统的各项特性使得其可作为抗体筛选、抗体糖基化修饰等研究的有效手段。同时,该法可作为抗体药物ADCP活性的常规检测方法及批签发检测指标。

图2. Rhinogen® ADCP Reporter Bioassay检测流程图

运输及存储:

运输方式:干冰运输

储    存:收到细胞后,请立即将ADCP Bioassay 效应细胞冻存管转移至-140°C以下的保存条件长期保存。

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苏州瑞安生物科技有限公司(RHINOZYME BIOTECHNOLOGY)创立于2015年,专注于生物医药研发配套试剂的开发,包括重组抗原,靶向抗体药物的单克隆抗体,抗体药物偶联物(ADCs)辅料,药物评价与分析试剂,CHO细胞培养基五大系列核心产品,目标成为中国最专业的生物医药研发配套试剂供应商。

公司坐落于苏州工业园区生物纳米科技园内,拥有1000m2生物研发实验区和独立的商务办公区。核心研发团队和管理团队有着生物医药领域十几年从业经验,熟悉国内外行业法规及药物评价与分析试剂的技术标准等。

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