聚合美

M5 PfuDash DNA Polymerase

 ( with dNTPs）使用说明书

产品名称                   单位          货号

M5 PfuDash DNA Polymerase    100U       MF272-01

M5 PfuDash DNA Polymerase    5×100U     MF272-05

【储存条件】

长期保存，请置于-20˚C，有效期24个月。经常使用，可置于4˚C保存至少六个月。

【产品简介】

聚合美PfuDash DNA聚合酶具有5’ 到3’ DNA 聚合酶活性和3’ 到5’ 的外切酶活性(即校读活性)，能够纠正DNA扩增过程中产生的碱基错配现象，在标准缓冲液中其保真度约相当于普通Taq DNA Polymerase的30倍、普通Pfu DNA Polymerase的2倍。同时该酶还具有快速的DNA合成速度，约相当于普通Taq DNA Polymerase的4-6倍、普通Pfu DNA Polymerase的8-10倍。该酶合成能力很强，即使是复杂的模板，也能快速准确的完成反应，尤其适用于对保真性要求高的DNA长片段的快速扩增，如基因克隆、测序、定点突变、SNP分析等，也可用于DNA片段的末端补平。使用聚合美PfuDash DNA聚合酶扩增得到的PCR产物无3＇端突出碱基，不可直接用于TA克隆，可以直接连入聚合美特制的平末端TOPO克隆载体（货号MF021和MF022）。

【单位定义】

用大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74˚C、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物所需的酶量。

【产品组份】

PfuDash DNA Polymerase (1U/μl)          100 μl

10×PfuDash PCR Buffer                  1.0 ml

25mM MgSO4                      1.0 ml

2mM dNTPs                       1.0 ml

【质量控制】

以λ DNA为模板，能有效扩增20 kb的DNA片段；以基因组DNA为模板，能有效扩增单拷贝基因；无内切酶和外切酶污染。

【适用范围】

高保真扩增，长片段的快速扩增，如基因克隆、定点突变等；高GC含量、具有二级结构的复杂模板的扩增。

【操作示例】

按下表配制PCR反应体系:

10×PfuDash PCR Buffer                        

2.5 μl

25mM MgSO4

2.5 µl

2mM dNTPs

2.5 µl

 Primer 1 (10 μM)                      

0.5 µl

 Primer 2 (10 μM)                     

0.5 µl

Template DNA* 

10-200ng

PfuDash DNA Polymerase

0.5µl

 ddH2O补足至

25 µl

建议的PCR条件：

95°C

2 min.

32-36 cycles of:

95°C

25 sec. 

53–64°C

20-35sec. 

72°C

15-30sec./1kb  

72°C

5 min. 

4°C

forever

。

【备注】

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。