高效液相法测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量

摘要：

建立测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的高效液相色谱方法。

采用

Agilent 

Eclipse XDB-C

18

色谱柱

(4. 6 mm 

×

150 mm, 5 

μ

m

)

；流动相为

0. 1 %

磷酸

(A) -

乙腈

(B)

；梯

度洗脱；流速为

1.0 mL

·

min

-1

；检测波长为

333 nm

。小檗碱在

0.0061~ 0.0243 mg

·

mL

-1

范

围内，黄芩苷在

0.038 

~ 

0.152mg

·

mL

-1

范围内线性关系良好。本文中所建立的色谱方法可

以简便、准确同时测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。

关键词

: 

三黄片；盐酸小檗碱；黄芩苷；高效液相色谱法

ABSTRACT: 

To establish a HPLC method for the simultaneously determination of berberine 

hydrochloride 

and 

baicalin 

in 

Sanhuang 

tablet.

The 

determination 

was 

performed 

on 

a 

Agilent 

Eclipse 

XDB-C

18

(4.6 

mm 

×

150 

mm, 

5 

μ

m) 

with 

mobile 

phase(using 

gradient) 

consisted 

acetonitrile-0.1%H

3

PO

4

 at flowing rate 1.0 mL

•

min

–

1

. The detection wavelength was at 333 nm. 

The 

method 

had 

good 

linear 

relationship 

within 

the 

range 

of 

0.0061~ 

0.0243 

mg

·

mL

-1

for 

berberine 

hydrochloride 

and 

within 

the 

range 

of 

0.038 

~ 

0.152 

mg

·

mL

-1

for 

baicalin.

The 

chromatographic 

method 

established 

can 

be 

used 

simply 

and 

accurately 

to 

simultaneously 

determine berberine hydrochloride and baicalin in Sanhuang tablet.

KEY 

WORDS: 

Sanhuang tablet

; 

berberine hydrochloride

；

baicalin

；

HPLC 

三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成，具有清热燥湿、泻火解毒等功效，主治热

毒内盛、高热烦躁、湿热黄疸、下痢。

《中国药典》

2015

年版一部规定对三黄片中的盐酸小

檗碱和黄芩苷进行定量测定应用的是不同的流动相分别测定

[1]

。

。

HPLC

是测定三黄片中黄芩

苷和小檗碱的主要测定方法，

本文建立了同时测定三黄片中盐酸小檗碱和黄芩苷含量的高效

液相色谱方法，为进一步控制中药制剂的质量提供参考

[2-6]

。

1 

仪器与试药

Agilent 1200

高效液相色谱仪

(

美国

Agilent 

公司

)

；

盐酸小檗碱对照品

(

中国药品生物制

品检定所，批号

110713-200208

，含量大于

98%)

；黄芩苷对照品

(

中国药品生物制品检定所，

批号

110715-200815

，含量

99.99%)

；三黄片；乙腈为色谱级；其他试剂均为分析纯。

2 

方法与结果

2. 1

色谱条件

色谱柱

: 

Agilent

 Eclipse XDB-C

18

 (4. 6 mm

×

150 mm, 5 

μ

m

)

；柱温

30 

℃；

流动相为

0.1 %

磷酸

(A) -

乙腈

(B)

；流速为

1.0 mL

•

min 

- 1

；梯度洗脱，

0

～

10 min

，

24 %B

线

性增加至

31% B

；

在

10~20 min

，

B

相线性改变至

65%B

；

在

20~35 min

，

B

相线性改变至

70%B

，

检测波长为

333 nm

。

2.2

对照品溶液制备

分别精密称取

1.214 mg

盐酸小檗碱、

7.6 mg

黄芩苷对照品，

各自用甲

醇溶解，

制成每

1 mL

中分别含

0.121 4 mg

盐酸小檗碱和

0.76mg

黄芩苷的对照品储备溶液，

即得备用。

2.3

供试品溶液的制备

取三黄片样品，去包衣，研细，精密称取相当于平均片重的样品，

置于

100 mL

锥形瓶中，

精密加入

70%

甲醇

50 mL

溶解，

称定重量，

超声提取

30 min

，

放冷，

摇匀，滤过，用溶剂定容于

100 mL

容量瓶，作为供试品溶液。

2.4 

专属性试验

分别精密吸取盐酸小檗碱、黄芩苷混合对照品溶液、二个厂家的供试品溶液各

10 

μ

L

注

入色谱仪，

记录色谱图。

同时在阴性对照溶液中，

未检出盐酸小檗碱和黄芩苷对照品色谱峰，

表明处方中其它成分对盐酸小檗碱和黄芩苷的测定无干扰。

HPLC

详见图

1

。