WB提完蛋白，跑完电泳下一步应该做什么？

众所周知在Western Blotting（蛋白免疫印迹）实验中，电泳之后的步骤就是转印。此步骤将蛋白从凝胶移动到合成膜上，并与膜相结合，形成印迹。

电转印是蛋白免疫印迹中最常见的转印方法，该方法的原理是利用电场力驱动蛋白从凝胶中洗脱转移到膜上。此过程中，将凝胶和膜贴合在一起之后在夹上滤纸放置在两个电极之间，然后在电极之间施加电压，蛋白分子在电场力的作用下迁移到膜上。电压及电极间距都会影响蛋白从凝胶中洗脱的速率。针对不同分子量的蛋白需要进行转印条件优化，以防止转印不足（蛋白不完全从凝胶中转移到膜上），或转印过度（蛋白穿透印迹膜造成损失）。

一. 转印膜的种类                                                    

1.1 聚偏二氟乙烯（PVDF）

PVDF 膜具有很强的蛋白结合能力（约为硝化纤维素的两倍），并且在通常的处理中不易破裂，因此可以用于抗体的剥离和重孵育实验。低荧光背景的PVDF膜结合了PVDF的优势，并且在很宽的波长范围内具有低自发荧光。在长时间曝光情况下，不会增加背景荧光水平，有利于检测微弱的荧光信号，是WB最常用的转印膜。

PVDF膜通常有0.45 μm和0.2 μm 两种孔径可供选择：

大多数免疫印迹实验，可使用0.45 μm孔径为 的膜；

而转印低分子量蛋白 (