超滤离心管怎么清洗 |
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超滤离心管怎么清洗? 一,超滤离心管的作用: 1.新购买的超滤离心管无需任何其他处理即可直接使用。 2.超滤离心管不能高压灭菌。 3.采用超滤离心管浓缩。 4.海水淡化。 5,变更缓冲区 6.具有部分纯化作用。 蛋白质浓缩过程中超滤离心管的处理: 超滤离心管可以重复使用,用0.1M NaOH浸泡1-2小时,用水洗涤,然后在离心机上用相关溶液(无菌水或PBS)洗涤3次,可用于浓缩新的离心管。蛋白;清洁过程不得马虎。 3.常用超滤离心管的放置: 高频超滤离心管应放在0.1M NaOH溶液中1-2小时,用水洗涤,并用消毒水浸泡。确保使滤膜保持湿润且不滋生细菌;清洁。) 四,超滤离心管的处理: 使用率低的超滤离心管应在0.1M NaOH溶液中放置1-2小时,用水洗涤,再浸入20%乙醇中保存。确保使滤膜保持湿润且不滋生细菌; (注:经常检查)。 五,超滤离心管的离心速度: 离心机的速度通常为4000rpm(建议3000g,最大不能超过4000g)。离心5-8分钟,将4ml样品浓缩至不足1ml到数十微升。如果速度太高,目标蛋白质将脱落,从而导致目的。蛋白质流失;速度太慢,费时,工作效率低; 6.使用吸头伸入超滤离心管时,请注意: 向超滤离心管中加入缓冲液或蛋白质溶液。您可以使用蓝色移液器吸头(1000ul)。在过滤管底部吸取浓缩的目标蛋白时,必须使用黄色的移液管吸头(200ul);使用移液器吸头刺入超滤管时,必须防止接触滤膜,以免刺破滤膜; 七,使用超滤离心管减少蛋白质的吸附损失: 超滤离心管的滤膜将吸附蛋白质,可导致目标蛋白质减少多达30%;为了减少蛋白质损失,在吸取目标蛋白质溶液后,用蛋白质缓冲液冲洗超滤管底部。可以冲洗掉过滤器吸附的蛋白质,以减少目标蛋白质的损失。通常,无论如何离心,大约200μl的蛋白质溶液都会残留在底部。 如何定义超滤离心管是否失败: 在正常使用情况下,当不刺穿超滤离心管时,浓缩的蛋白质溶液中不含蛋白质或蛋白质含量低(包括目标蛋白质),并且第一个滤液中含有目标蛋白质,这表明滤膜失效,并且需要更换新的超滤管。 |
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