高中生物必修一检测蛋白质的实验 |
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folin—酚试剂法。 此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即folin-酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色巧岁反应产生深兰色的原因是在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。 扩展资料: 注意事项: 样品应是均匀的,若是固体样品应事先研细过筛,液体样要混合均匀。 样品放入凯氏烧孝誉瓶时,不要黏附瓶颈上,万一黏附可用少量水缓慢冲下,以免被检样消化不完全,使结果偏低。 如果称1g以上的样品,就需要K氏烧瓶最小500ml,800~1000ml的更好,这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间,加热的均匀性和完全氨化效果最好。巧宽段 向蒸馏瓶中加入浓碱时,往往出现褐色沉淀。这时由于分解促进剂与加入的硫酸铜反应,生成氢氧化铜,经加热后又分解生成氧化铜的沉淀,有时Cu离子与氨作用生成深兰色的络合物。 参考资料来源:百度百科-蛋白质分析实验技术指南 |
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