（图无法显示）

蛋白质化学

一、填空题

1．构成蛋白质的氨基酸有           种，一般可根据氨基酸侧链（R）的        大小分为                 侧链氨基酸和                   侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有                 性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有                性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是            氨基酸和          氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是             氨基酸和            氨基酸。

2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有          氨基酸、            氨基酸或           氨基酸。

3．丝氨酸侧链特征基团是          ；半胱氨酸的侧链基团是          ；组氨酸的侧链基团是

 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 

4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是         ，除脯氨酸以外反应产物的颜色是          ；因为脯氨酸是—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示        色。

5．蛋白质结构中主键称为           键，次级键有            、            、

             、            、            ；次级键中属于共价键的是          键。

6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子亚基的第六位

             氨酸被                氨酸所替代，前一种氨基酸为             性侧链氨基酸，后者为                性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。

7．Edman反应的主要试剂是                      ；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是                             。

8．蛋白质二级结构的基本类型有                    、                   、

                      和                 。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 

                   键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与                、                、                 

有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的-螺旋往往会                  。

9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是

                        和                 。

10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是             、               。

11．在适当浓度的-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的              被破坏造成的。其中-巯基乙醇可使RNA酶分子中的             键破坏。而8M脲可使             键破坏。当用透析方法去除-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为             。

12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是                   、                        。

13．在生理pH条件下，蛋白质分子中             氨酸和             氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而             氨酸、             氨酸或           氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。

14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为                            ，单个肽平面及包含的原子可表示为                                       。

15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以              离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸（主要）以              离子形式存在；当pH＜pI时，氨基酸（主要）以              离子形式存在。

16．侧链含—OH的氨基酸有              、              和              三种。侧链含—SH的氨基酸是            氨基酸。

17．人体必需氨基酸是指人体自身不能合成的、必须靠食物提供的氨基酸。这些氨基酸包括               、               、                、               、

              、              、               、                 等八种。

18．蛋白质变性的主要原因是                   被破坏；蛋白质变性后的主要特征是                                        ；变性蛋白质在去除致变因素后仍能（部分）恢复原有生物活性，表明               没被破坏。这是因为一级结构含有                的结构信息，所以蛋白质分子构象恢复后仍能表现原有生物功能。

19．盐析作用是指                                                     ；盐溶作用是指                                                             。

20．当外界因素（介质的pH＞pI、电场电压、介质中离子强度、温度等）确定后，决定蛋白质在电场中泳动速度快慢的主要因素是               和              。

二、选择填空题

1．侧链含有咪唑基的氨基酸是（    ）

   A、甲硫氨酸     B、半胱氨酸      C、精氨酸     D、组氨酸

2．PH为8时，荷正电的氨基酸为（    ）

   A、Glu          B、Lys           C、Ser         D、Asn

3．精氨酸的Pk1=2.17、Pk2=9.04（-NH3）Pk3=12.48（胍基）PI=（    ）

   A、1/2(2.17+9.04)                  B、1/2(2.17+12.48) 

   C、1/2(9.04+12,48)                 D、1/3（2.17+9。04+12。48）

4．谷氨酸的Pk1=2.19(-COOH)、pk2=9.67(-NH3)、pk3=4.25(-COOH) pl=（    ）

   A、1/2（2.19+9。67）              B、1/2（9.67+4.25）

   C、1/2(2.19+4.25)                 D、1/3(2.17+9.04+9.67) 

5．氨基酸不具有的化学反应是（    ）

   A、肼反应     B、异硫氰酸苯酯反应    C、茚三酮反应    D、双缩脲反应

6．当层析系统为正丁醇∶冰醋酸∶水=4∶1∶5时，用纸层析法分离苯丙氨酸（F）、丙氨酸（A）和苏氨酸（T）时则它们的Rf值之间关系应为：（    ）

   A、F＞A＞T    B、F＞T＞A       C、A＞F＞T         D、T＞A＞F

7．氨基酸与亚硝酸反应所释放的N2气中，氨基酸的贡献是（    ）

   A、25%        B、50%           C、80%          D、100%

8．寡肽或多肽测序时下列试剂中最好的是（    ）

   A、2，4-二硝基氟苯     B、肼     C、异硫氰酸苯酸     D、丹酰氯

9．下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容的是（    ）

   A、多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序

   B、多肽链中氨基酸残基的键链方式

   C、多肽链中主肽链的空间走向，如-螺旋

   D、胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键，分别是A7-S-S-B7，A20-S-S-B19

10．下列叙述中哪项有误（    ）

    A、蛋白质多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序在决定它的二级结构、

三级结构乃至四级结构中起重要作用

    B、主肽链的折叠单位～肽平面之间相关一个C碳原子

    C、蛋白质变性过程中空间结构和一级结构被破坏，因而丧失了原有生物活性

    D、维持蛋白质三维结构的次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力和范德华力

11．蛋白质变性过程中与下列哪项无关（    ）

    A、理化因素致使氢键破坏          B、疏水作用破坏

    C、蛋白质空间结构破坏            D、蛋白质一级结构破坏，分子量变小

12．加入下列试剂不会导致蛋白质变性的是（    ）

    A、尿素（脲）    B、盐酸胍      C、十二烷基磺酸SDS    D、硫酸铵

13．血红蛋白的氧合动力学曲线呈S形，这是由于（    ）

    A、氧可氧化Fe（Ⅱ），使之变为Fe（Ⅲ）

    B、第一个亚基氧合后构象变化，引起其余亚基氧合能力增强

    C、这是变构效应的显著特点，它有利于血红蛋白质执行输氧功能的发挥

    D、亚基空间构象靠次级键维持，而亚基之间靠次级键缔合，构象易变

14．下列因素中主要影响蛋白质-螺旋形成的是（    ）

    A、碱性氨基酸的相近排列          B、酸性氨基酸的相近排列

    C、脯氨酸的存在                  D、甘氨酸的存在

15．蛋白质中多肽链形成-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（    ）

    A、疏水键        B、肽键         C、氢键          D、二硫键

16．关于蛋白质结构的叙述，哪项不恰当（    ）

    A、胰岛素分子是由两条肽链构成，所以它是多亚基蛋白，具有四级结构

    B、蛋白质基本结构（一级结构）中本身包含有高级结构的信息，所以在生物

体系中，它具有特定的三维结构

    C、非级性氨基酸侧链的疏水性基团，避开水相，相互聚集的倾向，对多肽链

在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用

    D、亚基间的空间排布是四级结构的内容，亚基间是非共价缔合的

17．有关亚基的描述，哪一项不恰当（    ）

    A、每种亚基都有各自的三维结构

    B、亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在

    C、一个亚基（单位）只含有一条多肽链

    D、亚基单位独立存在时具备原有生物活性

18．关于可溶性蛋白质三级结构的叙述，哪一项不恰当（    ）

    A、疏水性氨基酸残基尽可能包裹在分子内部

    B、亲水性氨基酸残基尽可能位于分子内部

    C、羧基、氨基、胍基等可解离基团多位于分子表面

    D、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等残基尽可能位于分子内部

19．蛋白质三级结构形成的驱动力是（    ）

    A、范德华力     B、疏水作用力      C、氢键         D、离子键

20．引起蛋白质变性原因主要是（    ）

    A、三维结构破坏                     B、肽键破坏

    C、胶体稳定性因素被破坏             D、亚基的解聚

21．以下蛋白质中属寡聚蛋白的是（    ）

    A、胰岛素       B、Rnase           C、血红蛋白     D、肌红蛋白

22．下列测定蛋白质分子量的方法中，哪一种不常用（    ）

    A、SDS-PAGE法  B、渗透压法  C、超离心法  D、凝胶过滤（分子筛）法

23．分子结构式为HS－CH2－CH－COO－的氨基酸为（    ）

   A、丝氨酸       B、苏氨酸         C、半胱氨酸      D、赖氨酸

24．下列氨基酸中为酪氨酸的是（    ）

    A、     -CH2－CH－COO－          B、HO－   －CH2－CH－COO－

                 NH3                                NH3

    C、        CH2－CH－COO－      D、CH3－S－CH2－CH2－CH－COO－

                    NH3                               NH3

25．变构效应是多亚基功能蛋白、寡聚酶及多酶复合体的作用特征，下列动力学曲线中哪种一般是别构酶（蛋白质）所表现的：（    ）

   A、              B、              C、             D、

26．关于二级结构叙述哪一项不正确（    ）

    A、右手-螺旋比左手-螺旋稳定，因为左手-螺旋中L-构型氨基酸残基侧链

空间位阻大，不稳定；

    B、一条多肽链或某多肽片断能否形成-螺旋，以及形成的螺旋是否稳定与它

的氨基酸组成和排列顺序有极大关系；

    C、多聚的异亮氨基酸R基空间位阻大，因而不能形成-螺旋；

    D、-折叠在蛋白质中反平行式较平行式稳定，所以蛋白质中只有反平行式。

27．根据下表选出正确答案：

样品液中蛋白质的组分 蛋白质的pI 蛋白质分子量MW(KD)

A 6.2 40

B 4.5 30

C 7.8 60

D 8.3 80

①pH8.6条件下电泳一定时间，最靠近阳极的组分一般是（    ）；

②SephadexG100柱层析时，最先洗脱出来的组分应该是（    ）。

28．前胰岛素原信号肽的主要特征是富含下列哪类氨基酸残基（    ）

    A、碱性氨基酸残基               B、酸性氨基酸残基

    C、羟基氨基酸残基               D、亲水性氨基酸残基

29．蛋白质三维结构的构象特征主要取决于（    ）

    A、氨基酸的组成、顺序和数目         B、氢键、盐键、范德华力和疏水力

    C、温度、pH和离子强度等环境条件    D、肽链间或肽链内的二硫键

30．双缩脲法测定禾谷类作物样品中的蛋白质含量时，加入少量的四氯化碳（CCl4)其主要作用是（    ）

    A、促进双缩脲反应               B、消除色素类对比色的干扰

    C、促进难溶性物质沉淀           D、保持反应物颜色的稳定

31．醋酸纤维薄膜电泳时，下列说法不正确的一项是（    ）

    A、点样前醋酸纤维薄膜必须用纯水浸泡一定的时间，使处于湿润状态

    B、以血清为样品，pH8.6条件下，点样的一端应置于电泳槽的阴极一端

    C、电泳过程中保持恒定的电压（90～110V）可使蛋白质组分有效分离

    D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾，结果不易分析

三、是非判断（用“对”、“错”表示，并填入括号中）

1．胰岛素分子中含有两条多肽链，所以每个胰岛素分子是由两个亚基构成（    ）

2．蛋白质多肽链中氨基酸的种类数目、排列次序决定它的二级、三级结构，即一级结构含有高级结构的结构信息。（    ）

3．肽键中相关的六个原子无论在二级或三级结构中，一般都处在一个刚性平面内。（    ）

4．构成天然蛋白质的氨基酸，其D－构型和L－型普遍存在。（    ）

5．变构效应是蛋白质及生物大分子普遍的性质，它有利于这些生物大分子功能的调节。（    ）

6．功能蛋白质分子中，只要个别氨基酸残基发生改变都会引起生物功能的丧失。（    ）

7．具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质有的生物活性。（    ）

8．胰岛素分子中含有A7-S-S-B7，A20-S-S-B19和A6-S-S-A11三个二硫键，这些属于二级结构的内容。（    ）

9．-折叠是主肽链相当伸展的结构，因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。（    ）

10．在RNase（核糖核酸酶）分子中存在His12、His119侧链的咪唑基及Lys41-NH3由于多肽链是按特定方式折叠成一定空间结构，这三个在一级结构上相距甚远的氨基酸残基才彼此靠近构成RNase的催化中心。（    ）

11．变性后的蛋白质电泳行为不会改变（    ）

12．沉降系数S是蛋白质以及核酸分子量大小常用的表示单位。（    ）

13．调节溶液的pH值对盐析分离蛋白质影响不大。（    ）

14．Folin-酚试剂法测定蛋白质的灵敏度较高，但由于不同蛋白质含有酪氨酸的量不尽相同，会使测定结果往往带来较大偏差。（    ）

15．重金属盐对人畜的毒性，主要是重金属离子会在人体内与功能蛋白质结合引起蛋白质变性所致。（    ）

16．利用蛋白质系数计算粗蛋白含量时对不同的生物样品都一样（即为6.25）。（    ）

17．胰蛋白酶作用时对肽键N-端氨基酸残基的要求是赖氨酸或精氨酸，这种专一性可称为基团专一性。（    ）

18．同源蛋白质中，保守性较强的氨基酸残基在决定蛋白质三维结构与功能方面起重要作用，因此致死性突变常常与它们的密码子突变有关。（    ）

                            O

19．肽平面或酰胺平面是因为－C－NH－结构中   C=0的电子离域或说是sp2杂化N的孤对电子与  C=0  P-共轭后引起的。（    ）

20．有两种蛋白质A和B的等电点分别是6.5和7.2，在pH为8.5的条件下同一静电场中A一定比B向异极泳动速度快。（    ）

21．多肽链出现180°回折的地方会形成转角，其中甘氨酸和脯氨酸常出现在-转角处，因为其侧链较短，对4→1氢键形成空间位阻小。（    ）

22．苯丙氨酸疏水性比缬氨酸强（    ）

23．由于静电作用，在等电点时氨基酸的溶解度最小（    ）

24．渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及PAGE（聚丙稀酰胺凝胶电泳）法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质的分子量的（    ）

25．当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0（    ）

26．蛋白质的亚基（或称为亚单位）和肽是同义词（    ）

四、解释下列名词

 1．二面角               2．蛋白质一级结构      3．蛋白质二级结构

 4．蛋白质三级结构       5．蛋白质四级结构      6．超二级结构

 7．别构效应             8．同源蛋白质          9．简单蛋白质

10．结合蛋白质          11．蛋白质变性作用     12．蛋白质盐析作用

13．蛋白质分段盐析      14．结构域             15．寡聚蛋白

16．构象                17．构型               18．肽单位

19．肽平面              20．—螺旋            21．—折叠或—折叠片

22．超二级结构          23．—转角            24．蛋白质的变性作用

25．蛋白质的复性作用    26．亚基

五、问答题

1．组成蛋白质的20种氨基酸依据什么分类？各类氨基酸的共同特性是什么？这种分类在生物学上有何重要意义？

2．蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何？

3．Edman反应所有的试剂和反应的特点如何？

4．何谓蛋白质等电点？等电点时蛋白质的存在特点是什么？

5．何谓盐析？分段盐析粗分蛋白质的原理是什么？

6．哪些因素可引起蛋白质变性？变性后蛋白质的性质有哪些改变？

7．蛋白质分离分析技术常用的有哪几种，简述凝胶过滤、电泳基本原理。

8．有哪些沉淀蛋白质的方法？其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点？

9．溴化氰在多肽裂解中的作用部位，和裂解产物的末端氨酸残基为何物？

10．举例说明蛋白质一级结构与功能关系。

11．举例说明蛋白质变构效应与意义。

12．一样品液中蛋白质组分为A（30KD）、B（20KD）、C（60KD），分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时，各组分被洗脱出来的先后次序。

13．多聚赖氨酸（poly－Lys）在pH7时呈无规线团，在pH10时则呈－螺旋；而多聚的谷氨酸酸（poly－Glu）在pH7时也呈无规线团，而在pH4时则呈－螺旋，为什么？

14．简述胰蛋白酶原激活过程。

15．－螺旋的特征是什么？如何以通式表示？

16．高浓度的硫酸铵（pH5时）可使麦清蛋白沉淀析出，并用于初步分离该种蛋白的早期步，简要说明其原理。

17．用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液（洗脱剂：pH3.25，0.2N柠檬酸钠），其结果如下：①各洗脱峰的面积大小或高度有何含义？②Asp比Glu先洗脱出来的原因？

      吸

      光

      度

                                           洗脱剂流出体积

18．为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？

六、计算题

1．测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量的0.29%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp的分子量为204Da）。

2．一种蛋白质按其重量含有1.65%亮氨酸和2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注：两种氨基酸的分子量都是131Da）。

3．某种氨基酸－COOHpK＝2.4，－N＋H3pK＝9.6，－N＋H3pK＝10.6，计算该种氨基酸的等电点（pI）。

4．某种四肽－COOHpK＝2.4，－N＋H3pK＝9.8，侧链－N＋H3pK＝10.6侧链－COOHpK＝4.2，试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？

5．有一种多肽，其侧链上羧基30个（pK＝4.3），嘧唑基有10个（pK＝7），－N＋H3（pK＝10），设C末端－羧基pK＝3.5，N－末端氨基pK＝9.5，计算此多肽的pI。

6．已知氨基酸平均分子量为120Da。有一种多肽的分子量是15120Da，如果此多肽完全以－螺旋形式存在，试计算此－螺旋的长度和圈数。

答  案：

一、填空    1. 20  非极性  极性  疏水  亲水  赖  精  天  冬    2.色  苯丙  

酪    3. －OH  －SH  －COOH    N  NH    4.氨基  紫红  亮黄    5.肽  氢键  二硫键  疏水作用（键）  范德华力  二硫键    6. 谷  缬  极  非极    7.异硫氰酸苯酯  从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定    8. -螺旋  -折叠  转角  无规卷曲  氢  氨基酸种类  数目排列次序  中断    9. 分子表面的水化膜  同性电荷斥力  10.溶解度最低  电场中无电泳行为    11.空间结构  二硫  氢  复性    12.正电  负电  13.谷  天冬  赖  精  细

   15. b    a    c

二、选择填空    1.D  2.B  3.C  4.C  5.D  6.A  7.B  8.C  9.C  10.C  11.D 12.D  13.B  14.C  15.C  16.A  17.C  18.B  19.B  20.A  22.B  23.C 24.B 25.B 26.D

三、判断题    1.×  2.√  3.√  4.×  5.√  6.×  7.×  8.×  9.×  10.√  11.×  12.√  13.×  14.√  15.√  16.×  17.√  18.√  19.√  20.×  21.×  22.√

六、计算题

1.解：Trp残基MW/蛋白质MW＝0.29%，蛋白质MW＝64138Da。

2.解：异亮氨酸/亮氨酸＝2.48%/1.65%＝1.5/1＝3/2

所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有2个，异亮氨酸至少有3个。由此推理出：

1.65%＝2×（131－18）/蛋白质MW

答案：蛋白质MW＝13697Da。

3.答案：pI＝10.1       4.答案：pI＝7.0

5.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有（30＋1）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15＋10＋1）个，相差了5个电荷。要想让正负电荷数相等，只能让30个羧基（侧链－COOHpK＝4.3）少带5个负电荷（－COOHpK＝3.5，它比侧链－COOH易于解离，难于接受质子），即在30个侧链－COOH中有25个处于解离状态（－COO－），5个不解离（－COOH）。因此：

pH＝pKa＋lg（[碱]/[酸]）＝4.3＋lg（25/5）＝5.0。

6.解：答案：肽链长度＝43.92(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量＝14640Da

核  酸

一、选择题

1．ATP分子中各组分的连结方式是：

   A、R-A-P-P-P   B、A-R-P-P-P   C、P-A-R-P-P  D、P-R-A-P-P  E、P-A-P-R-P

2．决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是：

   A、3′末端    B、TC环   C、二氢尿嘧啶环  D、额外环  E、反密码子环

3．构成多核苷酸链骨架的关键是：  

   A、2′，3′－磷酸二酯键   B、2′，4′－磷酸二酯键

   C、2′，5′－磷酸二酯键   D、3′，4磷酸二酯键

   E、3′，5′－磷酸二酯键

4．含稀有碱基较多的核酸是：

   A、核DNA      B、线粒体DNA     C、tRNA     D、mRNA     E、rRNA

5．有关DNA的叙述哪项绝对错误：

   A、A＝T      B、G＝C     C、Pu=Py      D、C总=C+mC   E、A=G，T=C

6．真核细胞mRNA帽结构最多见的是：

   A、m7ApppNmP   B、m7GpppNmP  C、m7UpppNmP

   D、m7CpppNmP   E、m7TpppNmP

7．DNA变性后，下列那一项变化是正确的? 

       A、对260nm紫外吸收减少     B、溶液粘度下降      C、磷酸二酯键断裂

       D、核苷键断裂               E、嘌吟环破裂

8．双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:

   A、A＋G      B、C＋T      C、A＋T      D、G＋C      E、A＋C

9．DNA复性的重要标志是:

   A、溶解度降低    B、溶液粘度降低   C、紫外吸收增大   D、紫外吸收降低二、填空题

1．核酸可分为         和         两大类，前者主要存在于真核细胞的      和原核细胞        部位，后者主要存在于细胞的          部位。

2．构成核酸的基本单位是          ，由           、           和          3个部分组成.

3．在DNA和RNA中，核苷酸残基以              互相连接，形成不分枝的链状分子。由于含氮碱基具有      ，所以核苷酸和核酸在     nm处有最大紫外吸收值。

4．细胞的RNA主要包括           、           和         3类，其中含量最多的是         ，分子量最小的是             ，半寿期最短的是              。

5．核外DNA主要有            、            和           。

6．RNA中常见的碱基是          、           、           和          。

7．DNA常见的碱基有           、            、            和            。其中          嘧啶的氢键结合性质类似于RNA中的           。

8．在含DNA和RNA的试管中加入稀的NaOH溶液，室温放置24小时后，       被水解了。

9．核苷中，核糖及脱氧核糖与碱基间的糖苷键是             键。

10．Watson-CrickDNA双螺旋每盘旋一圈有         对核苷酸，高度为         ，直径为         。

11．组成DNA的两条多核苷酸链是            的，两链的碱基顺序           ，其中     与     配对，形成     个氢键，      与     配对，形成      个氢键。

12．由于连接互补碱基的两个糖苷键并非彼此处于对角线的两端，在DNA双螺旋的表面形成较宽的              和较窄的               。

13．维持DNA双螺旋结构的主要作用力是         、           、            。

14．核酸变性时，260nm紫外吸收显著升高，称为            ；变性的DNA复性时，紫外吸收回复到原来水平，称为                  。

15．DNA热变性呈现出          ，同时伴随A260增大，吸光度增幅中点所对应的温度叫做            ，用符号         表示，其值的大小与DNA中           碱基对含量呈正相关。

16．DNA在水溶液中热变性后，如果将溶液迅速冷却，则大部分DNA保持       状态，若使溶液缓慢冷却，则DNA重新形成            。

17．稀有核苷中的糖苷键是           连接。

18．RNA一般以       存在，链中自身互补的反平行序列形成         结构，这种结构与它们间的单链组成                  结构。

19．病毒和噬菌体只含一种核酸，有的只有          ，另一些只有          。

20．染色质的基本结构单位是             ，由            核心和它外侧盘绕的          组成，核心由            各两分子组成，核小体之间由         相互连接，并结合有             。

21．tRNA的二级结构呈          型，三级结构呈         型，其3'末端有一共同碱基序列           ，其功能是                  。

22．真核 细胞的mRNA帽子由              组成，其尾部由           组成，帽子的功能是                     ，尾巴的功能是                       。

23．含氧的碱基有烯醇式和酮式两种互变异构体，在生理pH条件下，主要以      

           式存在，这有利于            形成。

三、是非题

1．DNA是生物遗传物质，RNA则不是。

2．同种生物体不同组织中的DNA，其碱基组成也不同。

3．核小体是构成染色体的基本单位。

4．多核苷酸链内共价键断裂叫变性。

5．DNA的Tm值和A-T含量有关，A-T含量高则Tm高。

6．真核生物mRNA的5'端有一个多聚A的结构。

7．DNA分子含有等摩尔数的A、G、T、C。

8．真核细胞的DNA全部定位于细胞核。

9．B－DNA代表细内DNA的基本构象，在某些情况下，还会呈现A型，Z型和三股螺旋的局部构象。

10．构成RNA分子中局部双螺旋的两个片段也是反向平行的。

11．复性后DNA分子中的两条链并不一定是变性之前的两条互补链。

12．自然界的DNA都是双链的，RNA都是单链的。

四、名词解释

反密码子  Chargaff规则   核酸的变性  核酸的复性  退火 增色效应  减色效应   发夹结构   分子杂交   DNA的解链(溶解)温度    碱基堆积力   超螺旋DNA  DNA的一级结构  DNA的二级结构   

五、问答题

1．核酸的组成和在细胞内的分布如何?

2．核酸分子中单核苷酸间是通过什么键连接起来的？什么是碱基配对？

3．简述DNA和RNA分子的立体结构，它们各有哪些特点？稳定DNA结构的力有哪些？

4．下列三种DNA中，哪个的Tm值最高？哪个的Tm值最低？为什么？

A、AAGTTCTCTGAATTA  B、AGTCGTCAATGCATT   C、GGATCTCCAAGTCAT

   TTCAAGAGACTTAAT    TCAGCAGTTACGTAA    CCTAGAGGTTCAGTA

5．将下列DNA分子加热变性，再在各自的最适温度下复性，哪种DNA复性形成原来结构的可能性更大？为什么？

A、ATATATATAT           B、TAGACGATGC

   TATATATATA               ATCTGCTACG

6．真核mRNA和原核mRNA各有何异同特点?

六、计算题

1．由结核分枝杆菌提纯出含有15.1％（按摩尔计算）的腺嘌呤的DNA样品，计算其它碱基的百分含量。

2．计算分子量为3×107的双螺旋DNA分子的长度，含有多少螺旋（按一对脱氧核苷酸的平均分子量为618计算）？

3．人体有1014个细胞，每个体细胞含有6.4×109对核苷酸，试计算人体DNA的总长度（Km）。

答  案：

一、选择题  1.B  2.E  3.E   4.C   5.E   6.B   7.B   8.D  9.D

二、填空题  1. DNA  RNA  细胞核  类（拟）核  细胞质    2. 核苷酸  戊糖 含氮碱基  磷酸    3. 3'－5'磷酸二酯键 共轭双键 260     4. mRNA tRNA rRNA  rRNA  tRNA  mRNA    5. 线粒体DNA  叶绿体DNA  质粒DNA     6. 腺嘌呤  鸟嘌呤  尿嘧啶  胞嘧啶    7. 腺嘌呤  鸟嘌呤  胸腺嘧啶  胞嘧啶  胸腺  尿嘧啶    8. RNA    9. C-N   10. 10  3.4nm  2nm    11. 反平行  互补  G  C  三  A  T  二     12. 大沟(槽)  小沟(槽)    13. 氢键 碱基堆积力 反离子作用  14. 增色效应  减色效应    15. 协同性 解链(溶解)温度  Tm  G+C    16. 单链  双螺旋    17. C-C    18. 单链 双螺旋 发夹或茎环    19. RNA  DNA   20.核小体 组蛋白 DNA  H2A H2B H3 H4  DNA  H1    21. 三叶草  倒L  CCA  结合氨基酸    22. m7GpppNmp  多聚腺苷酸  参与起始和保护mRNA  保护mRNA  23. 酮式  氢键

三、是非题  1．× 2．×3．√4．×5．×6．×7．×8．×9．√10．√11．√12．×

四、略。

五、问答题

1.核酸由DNA和RNA组成。在真核细胞中，DNA主要分布于细胞核内，另外叶绿体、线粒体和质粒中也有DNA；RNA主要分布在细胞核和细胞质中，另外叶绿体和线粒体中也有RNA。

2.核酸中核苷酸之间是通过3'－5'磷酸二酯键相连接的。碱基配对是指在核酸中G-C和A-T(U)之间以氢键相连的结合方式。

3.DNA双螺旋结构模型特点：两条反平行的多核苷酸链形成右手双螺旋；糖和磷酸在外侧形成螺旋轨迹，碱基伸向内部，并且碱基平面与中心轴垂直，双螺旋结构上有大沟和小沟；双螺旋结构直径2nm，螺距3.4nm，每个螺旋包含10个碱基对；A和T配对，G和C配对，A、T之间形成两个氢键，G、C之间形成三个氢键。DNA三级结构为线状、环状和超螺旋结构。

稳定DNA结构的作用力有：氢键，碱基堆积力，反离子作用。

RNA中立体结构最清楚的是tRNA，tRNA的二级结构为三叶草型，tRNA的三级结构为倒“L”型。

维持RNA立体结构的作用力主要是氢键。

4.c最高  a最低   c的G-C对多，a的G-C对少

5.a复性成原来结构可能性最大，因为它是单一重复序列。

6.真核mRNA的特点是：(1)在mRNA5'－末端有“帽子结构”m7G(5')pppNm；（2）在mRNA链的3'末端，有一段多聚腺苷酸(polyA)尾巴；（3）mRNA一般为单顺反子，即一条mRNA只含有一条肽链的信息，指导一条肽链的形成；（4）mRNA的代谢半衰期较长（几天）。原核mRNA的特点：（1）5'－末端无帽子结构存在；3'－末端不含polyA结构；（3）一般为多顺反子结构，即一个mRNA中常含有几个蛋白质的信息，能指导几个蛋白质的合成；（4）mRNA代谢半衰期较短（小于10分钟）。

六、1．A=T=15.1%  G=C=34.9%  2.1.65×10-3 cm  4854个   3．2.2×1011Km

 糖类化学

一、填空题   

    1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。    

    2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和________________试剂。    

    3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。

    4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。

    5.鉴别糖的普通方法为________________试验。      

    6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。

    7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。

    8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。   

    9.多糖的构象大致可分为________________、________________、________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是________________。

二、是非题

    1.[  ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。    

    2.[  ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳定。      

    3.[  ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。

    4.[  ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。   

    5.[  ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。

    6.[  ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。  

    7.[  ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。

    8.[  ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。

    9.[  ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。

   10.[  ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。

三、选择题

1.[  ]下列哪种糖无还原性?

         A.麦芽糖

         B.蔗糖

         C.阿拉伯糖

         D.木糖

         E.果糖

2.[  ]环状结构的己醛糖其立体异构体的数目为

         A.4

         B.3

         C.18

         D.32

         E.64

3.[  ]下列物质中哪种不是糖胺聚糖?

         A.果胶

         B.硫酸软骨素

         C.透明质酸

         D.肝素

         E.硫酸粘液素

4.[  ]下图的结构式代表哪种糖？

         A.α-D-葡萄糖

         B.β-D-葡萄糖

         C.α-D-半乳糖

         D.β-D-半乳糖

         E.α-D-果糖

5.[  ]下列有关葡萄糖的叙述,哪个是错的?

         A.显示还原性

         B.在强酸中脱水形成5-羟甲基糠醛

         C.莫利希(Molisch)试验阴性

         D.与苯肼反应生成脎

         E.新配制的葡萄糖水溶液其比旋光度随时间而改变

6.[  ]糖胺聚糖中不含硫的是

         A.透明质酸

         B.硫酸软骨素

         C.硫酸皮肤素

         D.硫酸角质素

         E.肝素

7.[  ]下列哪种糖不能生成糖脎?

         A.葡萄糖

         B.果糖

         C.蔗糖

         D.乳糖

         E.麦芽糖

8.[  ]下列四种情况中,哪些尿能和班乃德(Benedict)试剂呈阳性反应?

         (1).血中过高浓度的半乳糖溢入尿中(半乳糖血症)

         (2).正常膳食的人由于饮过量的含戊醛糖的混合酒造成尿中出现戊糖(戊糖尿)

         (3).尿中有过量的果糖(果糖尿)

         (4).实验室的技术员错把蔗糖加到尿的样液中

         A.1,2,3     B.1,3     C.2,4     D.4     E.1,2,3,4

9.[  ]α-淀粉酶水解支链淀粉的结果是

         (1).完全水解成葡萄糖和麦芽糖

         (2).主要产物为糊精

         (3).使α-1,6糖苷键水解

         (4).在淀粉-1,6-葡萄糖苷酶存在时,完全水解成葡萄糖和麦芽糖

         A.1,2,3     B.1,3     C.2,4     D.4     E.1,2,3,4

10.[  ]有关糖原结构的下列叙述哪些是正确的?

         (1).有α-1,4糖苷键

         (2).有α-1,6糖苷键

         (3).糖原由α-D-葡萄糖组成

         (4).糖原是没有分支的分子

         A.1,2,3     B.1,3     C.2,4     D.4     E.1,2,3,4

四、问答与计算

1.大肠杆菌糖原的样品25mg,用2ml 1mol/L H2SO4水解。水解液中和后,再稀释到10ml。最终溶液的葡萄糖含量为2.35mg/ml。分离出的糖原纯度是多少?

    2.  

上述化合物中(1)哪个是半缩酮形式的酮糖？(2)哪个是吡喃戊糖？(3)哪个是糖苷？(4)哪个是α-D-醛糖？

 3.五只试剂瓶中分别装的是核糖、葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉溶液,但不知哪只瓶中装的是哪种糖液,可用什么最简便的化学方法鉴别?

答案：

一填空题

1  D-葡萄糖  β-1，4

2  Fehling   Benedict

3  葡萄糖   糖原  糖原

4  D-葡萄糖  D-半乳糖  β-1，4

5  Molisch

6  糖胺聚糖   蛋白质

7  半缩醛（或半缩酮）羟基

8  离羰基最远的一个不对称

9  螺旋  带状  皱折 无规卷曲  糖链的一级结构

二是非题

1错 2错 3错 4错 5错 6错 7对 8对 9对 10对

三选择题

1B 2 D 3A 4C 5C 6A 7C 8A 9C 10A

四问答与计算

1  84.6％

2  （1）C  (2) D  （3）E  （4）B

3 用下列化学试剂依次鉴别

（1）碘I2 （2）Fehling试剂或Benedict试剂 （3）溴水 （4）HCl，甲基间苯二酚

核糖 － 黄色或红色 褪色 绿色

葡萄糖 － 黄色或红色 褪色 －

果糖 － 黄色或红色 －

蔗糖 － －

淀粉 蓝色或紫红色

酶

一、填空题

1．酶是              产生的，具有催化活性的                    。

2．T.Cech从自我剪切的RNA中发现了具有催化活性的           ，称之为    这是对酶概念的重要发展。

3．结合酶是由         和          两部分组成，其中任何一部分都        催化活性，只有                才有催化活性。

4．有一种化合物为Ａ－Ｂ，某一酶对化合物的Ａ，Ｂ基团及其连接的键都有严格的要求，称为                  ，若对Ａ基团和键有要求称为                 ，若对Ａ，Ｂ之间的键合方式有要求则称为                  。

5．酶发生催化作用过程可表示为Ｅ＋Ｓ→ＥＳ→Ｅ＋Ｐ，当底物浓度足够大时，酶都转变为                   此时酶促反应速成度为                。

6．竞争性抑制剂使酶促反应的km               而Vmax                  。

7．磺胺类药物能抑制细菌生长，因为它是                            结构类似物，能                 性地抑制                    酶活性。

8．当底物浓度远远大于Km，酶促反应速度与酶浓度                     。

9．PH对酶活力的影响，主要是由于它                和                 。

10．温度对酶作用的影响是双重的：①               ②                  。

11．同工酶是一类                 酶，乳酸脱氢酶是由                    种亚基组成的四聚体，有                 种同工酶。

12．与酶高催化效率有关的因素有          、            、                、

                 和活性中心的                    。

13．对于某些调节酶来说，、Ｖ对［Ｓ］作图是Ｓ形曲线是因为底物结合到酶分子上产生的一种           效应而引起的。

14．测定酶活力时要求在特定的             和          条件下，而且酶浓度必须                           底物浓度。

15．解释别构酶变构机理，主要有                和                 两种。

16．能催化多种底物进行化学反应的酶有              个Km值，该酶最适底物的Km值                 。

17.与化学催化剂相比，酶具有             、            、        和   

                     等催化特性。

18．在某一酶溶液中加入Ｇ-ＳＨ能提出高此酶活力，那么可以推测           基可能是酶活性中心的必需基团。

19．影响酶促反应速度的因素有             、              、             、

                      、               、                。

20．从酶蛋白结构看，仅具有三级结构的酶为        ，具有四级结构的酶     

              ，而在系列反应中催化一系列反应的一组酶为                     。

二、选择题

1．有四种辅因子(1)NAD，(2)FAD，（3）磷酸吡哆素，（4）生物素，属于转移基团的辅酶因子为：

   A、(1)(3)       B、(2)(4)       C、(3)(4)       D、(1)(4)

2．哪一种维生素具有可逆的氧化还原特性：

   A、硫胺素       B、核黄素       C、生物素       D、泛酸

3．含B族维生素的辅酶在酶促反应中的作用是：

   A、传递电子、质子和化学基团     B、稳定酶蛋白的构象

   C、提高酶的催化性质             D、决定酶的专一性

4．有机磷农药作为 酶的抑制剂是作用于酶活性中心的：

   A、巯基         B、羟基         C、羧基         D、咪唑基

5．从组织中提取酶时，最理想的结果是：

   A、蛋白产量最高                 B、转换系数最高

   C、酶活力单位数值很大           D、比活力最高

6．同工酶鉴定最常用的电泳方法是：

   A、纸电泳                       B、SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳

   C、醋酸纤维薄膜电泳             D、聚丙烯酰胺凝胶电泳

7．酶催化底物时将产生哪种效应

   A、提高产物能量水平             B、降低反应的活化能

   C、提高反应所需活化能           D、降低反应物的能量水平

8．下列不属于酶催化高效率的因素为：

   A、对环境变化敏感    B、共价催化    C、靠近及定向    D、微环境影响

9．米氏常数：

   A、随酶浓度的增加而增加             B、随酶浓度的增加而减小

   C、随底物浓度的增加而增大           D、是酶的特征常数

10．下列哪种辅酶结构中不含腺苷酸残基：

    A、FAD              B、NADP+       C、辅酶Q        D、辅酶A

11．下列那一项符合“诱导契合”学说：

    A、酶与底物的关系如锁钥关系 

    B、酶活性中心有可变性，在底物的影响下其空间构象发生一定的改变，才能

与底物进行反应。

    C、底物的结构朝着适应活性中心方向改变而酶的构象不发生改变。

    D、底物类似物不能诱导酶分子构象的改变

13．关于米氏常数Km的说法，哪个是正确的？

    A、饱和底物浓度时的速度        B、在一定酶浓度下，最大速度的一半

    C、饱和底物浓度的一半          D、速度达最大速度一半时的底物浓度

14．酶的竞争性抑制剂具有下列哪种动力学效应：

    A、Vm不变，Km增大             B、Vm不变，Km减小

    C、Vm增大，Km不变             D、Vm减小，K m不变

15．下面关于酶的描述，哪一项不正确：

    A、所有的酶都是蛋白质      B、酶是生物催化剂      C、酶具有专一性

    D、酶是在细胞内合成的，但也可以在细胞外发挥催化功能

16．催化下列反应的酶属于哪一大类：

    1，6—二磷酸果糖         3-磷酸甘油醛+磷酸二羟丙酮

    A、水解酶      B、裂解酶      C、氧化还原酶       D、转移酶

17．下列哪一项不是辅酶的功能：

    A、传递氢                   B、转移基团

    C、决定酶的专一性           D、某些物质分解代谢时的载体

18．下列关于酶活性中心的描述，哪一项是错误的：

    A、活性中心是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位

    B、活性中心的基团按功能可分为两类，一类是结合基团，一类是催化基团

    C、酶活性中心的基团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的基团

    D、不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性中心

19．下列哪一种抑制剂不是瑚珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂：

    A、乙二酸      B、丙二酸      C、丁二酸      D、碘乙酸

20．酶原激活的实质是：

    A、激活剂与酶结合使酶激活     B、酶蛋白的别构效应

    C、酶原分子空间构象发生了变化而一级结构不变

    D、酶原分子一级结构发生改变从而形成或暴露出活性中心

21．酶原激活的生理意义是：

    A、加速代谢                   B、恢复酶活性    

    C、生物自我保护的方式         D、保护酶的方式

22．一个简单的米氏酶催化反应，当[S]