红、蓝、绿三种Taq PCR Master Mix的区别与应用 |
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原标题:红、蓝、绿三种Taq PCR Master Mix的区别与应用 Taq PCR MasterMix 本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。 产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。 一、下面来说说3种Master Mix是什么染料。 1.红色Master Mix染料是甲酚红 2.蓝色Master Mix染料是溴酚蓝 3.而绿色Master Mix染料是二甲苯青+橙黄 二、染料起一个颜色指示的作用,基本各种染料都不影响实验结果,上面3种染料各有特点。 1.甲酚红全不抑制下游DNA 聚合酶,但是作为PH指示剂,对酸碱度变化很敏感,轻微的酸碱度变化,便会造成颜色改变,稍微偏酸一点(空气中碳酸溶解就能影响颜色改变),就会从紫红变成橘红,甚至橘黄。但是这个颜色改变并不影响实验结果,因为它实际的PH变化非常小,只是因为甲酚红灵敏度太高,正好在它的容易变色范围内。 2.而溴酚蓝,优点是价格便宜,对颜色不敏感,除非PH酸性到了5以下,才会变成红褐色,缺点是对DNA聚合酶有轻微抑制作用。文献有明确报道的。 3.绿色就是有人喜欢两种颜色指示剂,电泳时候有两条带,一条黄色,一条绿色。 更多资讯关注: 微信公众号:haoxin-bio返回搜狐,查看更多 责任编辑: |
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