重组胰蛋白酶消化液(1×) |
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产品描述 胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可裂解赖氨酸和精氨酸 C 端侧的肽键,水解细胞间的蛋白质,破坏细胞间的连接,从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。 瀚海新酶的重组胰蛋白酶消化液是一种微生物发酵的高纯度重组酶,不含动物源性,可替代猪或牛胰蛋白酶,用于免疫细胞治疗、疫苗、药物筛选、抗体等领域的细胞消化过程。本产品含有 EDTA,不含酚红。 产品性质 作用温和:因其纯度高,只有单一酶种作用,解离的特异性更强并且毒性更低。这一机理也可降低胰蛋白酶及其他提取试剂中的多种蛋白酶的解离破坏作用。 无动物源性:生产过程中不使用任何动物源原料,无外源病毒污染等潜在不确定因素的风险,符合药品管理规定 稳定性好:低温条件,2~8℃/-20~-5℃ 可避光储存 12 个月 使用方便:本品为无菌制剂,可替代实验方案中的胰蛋白酶,稀释可降低活性 储存条件:2-8℃,避光。避免反复冻融 有效期:自生产之日起 12 个月。 运输条件:2-8℃,避光运输。 使用说明 重组胰蛋白酶消化液(10×)可用于分离具有强粘附性的贴壁细胞系。 1. 使用前于 37℃ 预热消化液及培养液。注:重组胰蛋白酶消化液可在常温下用于多种细胞的消化。 2. 吸出用过的培养基并丢弃。 3. 使用 5mL 不含钙离子和镁离子的 DPBS 缓冲液洗涤细胞,去除残余培养基,吸出培养基并丢弃。 4. 添加适当体积的重组胰蛋白酶消化液,以能覆盖细胞为限。 5. 37℃ 孵育细胞,孵育期间使用显微镜下观察,至细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化,或者轻敲培养瓶发现细胞处于游离状态。 6. 在培养瓶中加入 5–10 mL 的预热完全的培养基。向各个方向倾斜以确保所有细胞均被悬浮,取细胞悬液至 15mL 离心管中。 7. 100×g 离心 5-10 分钟。 8. 弃去上清液,用 2–5 mL 预热的培养基重悬细胞沉淀。 9. 使用自动细胞计数器确定活细胞密度和存活百分比。 10. 根据您的细胞类型,按照常规方案进行后续实验。 注意事项:为了您的安全健康,请穿实验服并佩戴手套操作;本品不能用于人体。请于无菌环境下操作。 |
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