病毒基因组的变异势必导致病毒抗原的变异,而由抗原变异产生的新的抗原决定簇可逃脱针对原先抗原之抗体的中和作用,这在流感和艾滋病毒以及寄生虫感染中较为普遍。有证据表明, ASFV也有类似的免疫逃避现象,如野外强毒和低次细胞适应毒株能以较高效率被ASFV抗血清中和,而多代次细胞适应毒株能完全抵抗同样血清的中和作用[14]。

3　抗原竞争

Vinuela认为, AS FV 缺乏典型中和作用可能与抗原竞争有关,即处于强势的非中和性抗原抑制处于弱势的中和性抗原,这种竞争抑制可以发生在不同抗原分子之间,也可以发生在同一抗原的不同抗原决定簇之间[15 ]。若存在抗原分子间的竞争抑制,用分离自病毒颗粒或病毒感染细胞的病毒抗原及其基因重组产物免疫猪,应该能获得较好的中和抗体。为此,许多学者曾试图从病毒颗粒或病毒感染细胞分离外部蛋白抗原,用于制备单特异抗血清或单克隆抗体。然而, ASFV编码至少150个蛋白,欲从如此众多的蛋白抗原中找出具有竞争抑制或中和作用的抗原实属不易。到目前为止,除针对相对分子量为7. 2× 104 的主要结构蛋白的单抗[15]和针对另一结构蛋白(相对分子量为2. 7× 104 )的抗血清[16]具有一定程度的非典型中和作用外,尚未发现更为理想的保护性抗原。

要证明分子内的竞争抑制更为复杂,首先必须获得含有单一抗原决定簇的多肽及其特异抗体。目前这方面的研究不多,但近来发现,某些ASFV蛋白具有重复插入序列,其特点与某些寄生虫的“烟幕”抗原相似[17 ]。这些重复序列的抗原性及其对邻近抗原决定簇是否具有相互抑制作用,有待进一步研究。

4　免疫抑制

有证据表明, ASFV弱毒对由促有丝分裂原刺激引起的淋巴细胞激活不仅具有显著的抑制作用,而且与病毒的剂量和作用时间呈正相关。进一步研究发现: ①只有活病毒才具有抑制效应,表明病毒复制对抑制效应的产生是至关重要的;②抑制效应与病毒的毒力有关,强毒株具有相反的作用,即促有丝分裂原潜能和免疫球蛋白分泌活性;③病毒对T-和B-淋巴细胞均具有抑制作用,且显然是通过一种单核-吞噬细胞因子介导的[18 ]。

Ara la-chaves等[19 ]曾证实, ASFV 感染的猪单核细胞培养上清不仅能抑制由PHA刺激引起的猪和人血液单核细胞的增殖,而且能抑制小鼠对绵羊红细胞的初级免疫应答。随后的研究表明,上述培养上清中的免疫抑制因子是一种相对分子量为3. 6× 104 的多肽,用此纯化多肽处理的绵羊红细胞免疫小鼠, 2 d后脾脏中的非特异Ig 形成细胞明显增多; 随之出现对绵羊红细胞的特异抗体应答抑制,而且非特异Ig 分泌细胞愈多,特异抗体应答愈受抑制。最近,他们对此免疫抑制因子作了更深入的研究,除进一步证实上述免疫抑制作用外,还发现这种免疫抑制因子能延缓小鼠对同种异体皮肤移植的排斥。他们认为,由此抑制因子引起的非特异性过度刺激或多克隆B细胞激活,可能是该病毒在宿主体内赖以生存的一种策略,使机体不能产生强有力的中和抗体[20 ]。

5　免疫逃避

Alcami等[21 ]认为, ASFV 可能利用尚不清楚的免疫逃避机制,以逃脱宿主的有效免疫应答。ASF不能用常规疫苗防疫也使人们猜测,该病毒可能具有类似某些病毒(如痘病毒)的免疫逃避机制,以避免宿主的免疫监视功能。

痘苗病毒编码可溶性白细胞介素-1、γ-干扰素和肿瘤坏死因子受体,这些可溶性受体的共同特点是只含有位于细胞外的细胞因子结合部位,而缺少真正细胞因子受体的膜结合部位和与信号传递有关的细胞内尾部。因此,这些“受体”类似物能从病毒感染细胞释放到血流中去,在全身各处与细胞因子结合,以阻断相应细胞因子与其真正受体的结合。痘苗病毒还编码至少2个与抗干扰素有关的蛋白质,其作用机制之一是抵销干扰素诱导产生的抗病毒状态。此外,痘苗病毒还编码2个与补体控制蛋白类似的蛋白质[22]。

AS FV 基因组编码至少150个蛋白,其中约50个为病毒结构蛋白。可以想象,在其余的100多个非结构蛋白中,肯定有如痘苗病毒编码的免疫调控蛋白。目前,已经系统研究的ASFV 蛋白为数不多,但已经发现该病毒编码类似于T淋巴细胞吸附受体CD2的蛋白质[23]。CD2广泛存在于T淋巴细胞(包括不成熟胸腺细胞和成熟T细胞)上,而其2个配体( CD58和CD59)则广泛存在于抗原传递细胞上,两者结合与T细胞的吸附和激活有关。据此有人推测,由此CD2类似物引起的ASFV血吸附现象只不过是一种表象,而病毒编码该蛋白的真正目的是阻碍T细胞的吸附和激活,以此削弱宿主免疫应答中的细胞相互作用,降低免疫应答的等级。随着对ASFV编码蛋白深入广泛的研究,相信会有更多的免疫调控蛋白将被发现,但它能否揭开ASFV中和失败的神秘面纱还是个谜。

6　“木马”机制

Ma karov 等[24]认为,根据标准中和试验规则,大剂量抗体对ASFV复制所表现出的株特异性抑制不能称为体外中和试验,而体内中和失败与该病毒的特殊靶细胞(单核吞噬细胞)有关。这些靶细胞表面因具有抗体( IgG)的Fc 受体而具有调理吞噬作用,从而给藏于病毒-抗体复合物中的病毒以可乘之机,犹如藏于木马中的士兵混进城门那样进入靶细胞。这种所谓的“木马”机制在登革热等病毒感染中扮演的角色早为人们熟知。

为了证实上述观点, Makarov 等用猪骨髓细胞系统进行了体外中和试验和免疫电镜观察。体外中和试验显示,即使有补体(豚鼠血清)的参与,高浓度抗体( 1∶ 1稀释)也不能中和病毒;而电镜观察表明,抗体能与病毒外膜结合,形成的免疫复合物不仅能吸附猪骨髓细胞,而且能穿透细胞进入吞噬体。据此,他们对ASFV逃避中和作如下解释: ①由于单核吞噬细胞的吞噬功能和ASFV 的较大体积,病毒可借助不依赖调理素的吞噬作用或不依赖受体的胞饮作用进入靶细胞;②免疫复合物中的抗体虽然具有阻止病毒进入细胞的中和作用,但还具有和靶细胞的Fc受体结合、激活免疫复合物被吞噬的作用,这样总有一部分病毒混入细胞而不被中和。这种所谓的“木马”机制似乎能解释ASFV 的体内中和失败,但却不能解释细胞适应毒株的体外不完全中和,因为一些适合ASFV复制的细胞系(如Vero 细胞)并不具有Fc受体及其相应的调理吞噬功能,而用这些细胞系进行的体外中和试验仍表现为不完全中和[14]。从以上分析可以看出, ASFV几乎集所有病毒免疫逃避机制于一身,对其中和失败的原因虽有诸多解释,但都缺乏令人信服的证据。这种较为独特的非典型中和现象很可能是多种因素相互掺杂的结果而具有重要的理论研究价值。

（资料来源：母仪母猪天下之猪 孙怀昌）

返回搜狐，查看更多