微分干涉对比(DIC)显微镜

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微分干涉对比(DIC)显微镜

2024-07-12 15:21:18| 来源: 网络整理| 查看: 265

通过该棱镜的偏振光被剪切成两个具有不同偏转角度的紧密间隔光波:正常波和异常波它们具有垂直的偏振平面,对于这两个波,介质的行为就好像它真的具有两个折射率一样。波前剪切发生在两个棱镜之间,位置就在两者折射率交界处的干涉平面上光波在空间上由剪切角分开对于整个棱镜上的所有适配光波而言,它们的方向和间距完全一致。两道光波之间的空间必须小于显微镜的分辨率极限。

因此,样本被紧密间隔的光波照亮,而这些光波以横向位移的方式进入。如果这两种光波与具有不同折射率或厚度的样品部分发生相互作用,当它们从样本中透射而出时,他们的光路长度会有所不同。光路长度是光路上两点之间的折射率和厚度的乘积。因此,它与光的传输时间和速度有关。由于光路长度与光的传输时间有关,因此两个匹配的光波之间会发生相移。

光波穿过样本后,再通过另一个沃拉斯顿棱镜,将它们重新聚合在一起。此时,它们会相互干涉,形成椭圆形偏振光,然后通过分析仪。只有具有明显偏振平面的光波才能通过,因此,不同的光波会产生不同的振幅。相移转变为振幅偏移,导致所获图像的光强度不同。

对于现代DIC显微镜,沃拉斯顿棱镜经常进行改造。其中一个例子就是诺马斯基棱镜。它同样有两个双折射楔块组成,但只有一个楔块与沃拉斯顿棱镜的楔块相同。另一个楔块经过改造,令光轴处于倾斜位置。这种差异导致干涉平面位于棱镜之外。因此,这种棱镜可以位于物镜光圈平面之外,令DIC显微镜使用起来更加方便。

对于DIC显微镜,相邻对象点位的相移差异有助于成像。样本的细节,如果有折射率或厚度上的梯度变化,就可以实现更加清晰的视觉呈现。由于光束相互垂直偏振,因此通过旋转显微镜载物台可以看到图像的差异。

需要记住的是,在进行DIC显微镜检查时,切勿将样本放在塑料器皿中一起使用,因为塑料这样的聚合物对光具有去偏振作用,并且会扭曲对比度。



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