小鼠组织巨噬细胞和DC等细胞,应该如何设门? |
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平时,论坛中经常有站友拿着自己做的巨噬细胞或DC的实验结果图,来问为什么结果是这样子?其实很多主要是设门存在问题。 所以,在此从一篇引用率较高的文献中,取一幅好图分享如下,图A是详细方案,图B是站友们常用的精简方案: 这是区分正常小鼠肺组织髓系细胞亚群的设门策略。从酶消化的小鼠肺中分离细胞,剔除二倍体和碎片后,用CD45染色圈出免疫细胞。 (图A)较为详细的设门方案:肺泡巨噬细胞(MΦ)(Siglec F+CD11b−CD11c+CD64+)、CD103+树突状细胞(CD11c+CD103+CD24+)、中性粒细胞(CD11b+Ly6G+)和嗜酸性粒细胞(Siglec F+CD11b+CD11c−) (图B)精简方案区分巨噬细胞和树突状细胞。肺泡巨噬细胞和CD103+DC均被鉴定为CD11b−CD11c+细胞,之后用CD64和CD24进一步分群。如有必要,MHC II可用于确认CD103+DC中的设门。CD11b hi细胞上的门控可以将髓系细胞与不表达该标记的淋巴细胞(T和B细胞)或在中等表达该标记的淋巴细胞(NK细胞)分开。粒细胞(中性粒细胞和嗜酸性粒细胞)可被排除为CD24+CD11c−,而CD11b+DC(CD11b+MHC II+CD11c+CD24−CD64−)、间质巨噬细胞(CD11b+MHC II+CD11 c+CD64+CD24−)、单核/未分化巨噬细胞(CD11b+MHC II−CD64+/−Ly6Clo)的区分可继续进行。 欢迎转发到朋友圈,但谢绝复制粘贴转载 Promotions below 返回搜狐,查看更多 责任编辑: |
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