传代： （1）贴壁细胞： 1. 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2 培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次； 2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min； 3. 弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，按1:2 比例进行分瓶传代，补加培养基后放入 37℃，5%CO2 细胞培养箱中培养； （2）悬浮细胞: 待细胞达到1x10^6/ml左右可按照以下方法换液培养或传代。 方法①：收集细胞，1000rpm 离心 5min，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按 1：2 到 1：3的比例分到含培养基的新瓶中。 方法②：竖立放置培养瓶，细胞沉淀后弃去上半量培养基，将细胞悬液按 1：2 到 1：3 的比例分到含培养基的新瓶中。

冻存： 1. 离心收集细胞并进行计数(参考离心条件：1000rpm，5 min)。彻底移去离心管中的上清液； 3. 加入适量的无血清细胞冻存液（EK-Bioscience 货号：S002）于离心管中，调整细胞浓度至1~5×106 cells/mL。轻柔混匀，制成细胞冻存悬液； 4. 将离心管中的细胞冻存悬液分装于已标示完全的冻存管中； 5. 直接将含细胞悬液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存或转入液氮。

细胞收到处理方法 T25 培养瓶 收到细胞后检查外包装及细胞培养瓶是否完好，如有破损漏液等问题，请即时联系。正常请进行以下操作： 1. 75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部。 2. 将细胞放入 37 度培养箱中预温 3-4 小时后再做处理，以稳定细胞状态。 3. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）前三天照片为重要售后依据，不提供或未拍照默认收到 状态良好。